目的:1.通过临床观察静宁颗粒治疗注意缺陷多动障碍气阴两虚型患儿前后各量表评分及检测结果的变化和随访结果,并与静灵口服液组对照,评价静宁颗粒治疗ADHD的临床疗效,以及提供静宁颗粒治疗本病的远期疗效依据,为本方进一步开展重大新药的研发提供临床依据。2.采用Morris水迷宫检测注意缺陷多动障碍（ADHD）模型动物-幼年自发性高血压大鼠（SHR）学习记忆能力,评价静宁颗粒对SHR大鼠认知功能的影响,并观察静宁颗粒对SHR大鼠纹状体中单胺类神经递质DA、NE、5-HT、DOPAC、5-HIAA以及前额叶、纹状体中DATmRNA表达的影响,探讨静宁颗粒治疗ADHD的作用机制,为本方临床新药的开发提供实验支持和依据。方法:临床研究方面,将2014年9月至2016年12月于北京中医药大学东直门医院儿科门诊就诊的、同时符合美国精神病学会《精神障碍诊断和统计手册》2013年第五版（DSM-V）中儿童ADHD的诊断标准及中医证候诊断标准的ADHD患儿60例按照随机数字表法随机分为静宁颗粒组30例和静灵口服液对照组30例,治疗组以口服中药静宁颗粒,对照组服用静灵口服液治疗,疗程均为12周,观察有效率,治疗前后注意缺陷多动障碍量表（SNAP-Ⅳ）、中医证候评分、行为学量表评分、Conners父母问卷评分、多动指数、划消试验的改善情况以及进行血、尿、大便常规检查;肝（ALT）、肾（BUN、Cr）功能检查;心电图检查。记录不良反应事件。治疗结束后2月对有效病例采用注意缺陷多动障碍量表进行随访,观察有效病例的远期疗效。动物实验研究方面,将4周龄的SHR大鼠60只,适应性喂养3d后,随机将SHR大鼠分为6组,静宁方高、中、低剂量组、盐酸哌甲酯组、盐酸托莫西汀组、模型组,每组10只。将同龄Wistar大鼠10只设为正常对照组。分组灌胃,静宁颗粒剂给药量分别为高剂量23.14g/kg、中剂量11.57g/kg、低剂量5.785g/kg;盐酸哌甲酯组用量为3.86mg/kg;盐酸托莫西汀组用量为5.36mg/kg;模型组及正常对照组予等量蒸馏水灌胃,各组每天灌胃1次,连续治疗6周。第6周开始每天给药后进行一次Morris水迷宫实验检测各组大鼠认知功能;行为学观察结束后处死,高效液相-电化学（HPLC-ECD）检测大鼠纹状体单胺类神经递质DA、NE、5-HT、DOPAC、5-HIAA的表达情况,用SYBR GreenⅠ Real Time PCR方法检测大鼠前额叶、纹状体中DATmRNA转录水平的变化情况。结果:经过3个月的治疗,治疗组28例患儿中,显效5例（17.9%）,有效19例（67.9%）,无效4例（14.2%）,临床治疗总有效率85.71%;对照组26例患儿中,显效4例（15.4%）,有效17例（65.4%）,无效5例（19.2%）,临床治疗总有效率80.77%;对比两组患儿临床治疗效果,两组比较无显著性差异（P>0.05）。两组在中医证候的改善方面,治疗组中医主证、次证治疗前后有明显统计学差异（P<0.05）,改善效果明显;对照组中医主证（多动不宁、注意力不集中）,次证（少眠多梦、手足心热、口干及自汗、盗汗、舌脉）治疗前后亦有统计学差异（P<0.05）;两组疗后中医次证面色不华的差异有统计学意义（P<0.05）。表明治疗组疗后患儿主证（多动不宁、注意力不集中、学习效率低）以及次证（少眠多梦、手足心热、口干、面色不华、自汗、盗汗、舌脉）较治疗前均有改善,差异有统计学意义（P<0.05）。对照组疗后中医主证（多动不宁、注意力不集中）,次证（少眠多梦、手足心热、口干及自汗、盗汗、舌脉）较治疗前亦有改善,差异具有统计学意义（P<0.05）。两组治疗后对中医次证面色不华的改善情况,治疗组优于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。治疗组患儿治疗后注意缺陷多动障碍量表积分较治疗前明显降低,差异具有统计学意义（P<0.05）;对照组患儿治疗后注意缺陷多动障碍量表积分较治疗前无明显改善,差异无统计学意义（P>0.05）;两组疗后量表积分改善情况相比,治疗组疗后比对照组疗后注意缺陷多动障碍量表积分降低明显,治疗组优于对照组,差异具有统计学意义（P<0.05）。治疗组患儿治疗后多动指数较治疗前明显降低,差异有统计学意义（P<0.05）;对照组患儿治疗后多动指数较治疗前亦有明显降低,差异有统计学意义（P<0.05）;两组患儿疗后多动指数改善情况比较差异无统计学意义（P>0.05）。治疗组患儿治疗后漏划字数的改善较治疗前明显降低,差异有显著统计学意义（P<0.01）,对照组患儿治疗后漏划字数的改善较治疗前亦有明显降低,差异有显著统计学意义（P<0.01）;两组患儿治疗前后划消计分的改善情况均有统计学差异（P<0.05）;两组患儿疗后漏划字数的改善情况比较有显著统计学差异（P<0.01）,治疗组优于对照组;两组患儿治疗前后以及疗后错划字数改善的比较差异均无统计学意义（P>0.05）。两组疗后软神经体征得到改善,阳性率明显降低,阴性率明显提高。两组患儿在服用静宁颗粒和静灵口服液期间,血、尿、肝（ALT）、肾（BUN、Cr）功能检查、心电图等安全性指标均在正常参考值范围内,均无严重的不良反应情况发生。各组大鼠定位航行能力的影响:第2、3天,模型组逃避潜伏期与对照组大鼠相比延长（P<0.05）,与模型组小鼠相比,专注达组大鼠逃避潜伏期第2天明显缩短（P<0.05）,第3天逃避潜伏期时间与模型组相比,静宁高剂量组、静宁低剂量组、专注达组均缩短（P<0.05）。第4、5天,模型组大鼠与对照组大鼠相比时间均显著延长（P<0.01）,静宁高剂量组、静宁中剂量组、静宁低剂量组与模型组相比,均有缩短（P<0.05）,第5天静宁低剂量组大鼠逃避潜伏期与择思达组相比时间减短（P<0.05）。与正常组相比,择思达组大鼠逃避潜伏期延长（P<0.05）。各组大鼠空间探索能力的影响:第2天,模型组与对照组、专注达组相比,游泳距离延长（P<0.05）。第3天,静宁低剂量组、专注达组、正常组大鼠与模型组相比,游泳距离减少（P<0.05）,其余组则无明显差异（P>0.05）。第4、5天,模型组与对照组以及各干预组相比,游泳距离均延长（P<0.05）。静宁颗粒各剂量组与择思达组及正常组相比各天游泳距离均无明显差异（P>0.05）。各组大鼠空间学习记忆和记忆保持能力的影响:Morris水迷宫撤台实验大鼠的目标象限停留时间和穿越平台次数:与对照组大鼠相比,模型组大鼠目标象限停留时间缩短（P<0.05）,而与模型组相比,除外静宁高剂量组,各干预组目标停留时间均延长（P<0.05）。择思达组与静宁中剂量组、静宁低剂量组及模型组相比,目标停留时间均延长（P<0.05）。模型组大鼠60s内穿越平台次数与对照组大鼠相比减少（P<0.05）,静宁颗粒中、低组、择思达组与模型组相比穿越次数增加（P<0.05）。静宁颗粒各剂量组与正常组及择思达组相比穿越平台次数无明显差异（P>0.05）。纹状体及前额叶多巴胺转运体（DAT）mRNA表达水平比较:对于大鼠纹状体中DAT mRNA表达水平,组间存在差异。模型组与正常组比较,DAT mRNA在大鼠纹状体中表达≥2倍,认为该基因表达增高;与模型组比较,专注达组和静宁颗粒中、低剂量组DAT mRNA表达≤1/2倍,认为该基因表达降低。对于大鼠前额叶中DAT mRNA表达水平,组间存在差异。择思达组与正常组比较,DAT mRNA在大鼠纹状体中表达≥2倍,认为该基因表达增高;与模型组比较,静宁颗粒低剂量组、专注达组DAT mRNA表达≤1/2倍,认为该基因表达降低。高效液相-电化学（HPLC-ECD）检测神经递质结果比较:与模型组比较,正常对照组及静宁低剂量组大鼠脑组织纹状体中NE、DA、5-HT含量明显增高,择思达组DOPAC、5-HT含量增高;与正常对照组相比,静宁颗粒高剂量组NE、DA含量显著降低;与择思达组相比,静宁中剂量组5-HIAA降低。结论:静宁颗粒能够有效地改善气阴两虚证多动症患儿的临床核心症状（多动不宁、注意力不集中、学习效率低）以及次要症状（少眠多梦、手足心热、口干及自汗、盗汗、舌脉）,改善患儿注意缺陷多动障碍量表积分,显著改善ADHD患儿的注意力不集中情况,其临床治疗总疗效与静灵口服液相当,二药均有补肝肾之功,以达宁神益智之效。然静宁颗粒偏补气阴,对多动症气阴两虚证具有明显疗效,临床能够起到益气养阴的作用。并且,静宁颗粒对注意缺陷多动障碍气阴两虚型患儿的干预总体是安全的,无明显不良反应。静宁颗粒既可以影响SHR大鼠逃避潜伏期及游泳距离,又可以影响撤台后大鼠在目标象限停留时间和穿越平台次数,因此可以使SHR大鼠空间学习记忆能力得到改善。从本实验结果来看,与临床一线阳性药物择思达相比,静宁颗粒对记忆能力的改善稍次。静宁颗粒能够提高大鼠脑纹状体中DA、NE、5-HT含量,降低纹状体和前额叶中DAT mRNA表达水平,表明静宁颗粒与专注达组一样,能够下调SHR大鼠额叶-纹状体回路中DAT mRNA表达水平,减少突触前神经元对DA的重摄取,增加突触间隙的DA浓度,改善了中枢DA的神经信号传导功能,从而起到对ADHD的治疗作用。