诱变木霉菌株TUV-13遗传稳定性及其与水稻互作的研究

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木霉(Trichoderma spp.)属于半知菌亚门,丝孢纲,丛梗孢目,木霉属,是一种在自然界中分布广泛的真菌。本项目前期研究表明,当木霉菌对水稻形成机遇性共生体后,其对水稻的生长和抗病性具有一定的提高作用。本论文以对三唑类杀菌剂具有较好耐药性,抗性达到野生菌株10倍的哈茨木霉突变体TUV-13作为试验菌株,研究了其继代培养的5代,10代和20代耐腈菌唑能力和对水稻纹枯病菌(Rhizoctonia solani)、稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae),水稻恶苗病菌(Fusarium moniliforme),鱼腥草白绢病菌(Sclerotium rolfsii),辣椒疫病(Phytophthora capsici Leonian)病原菌的拮抗性,结果表明,该突变体的抗药性可以稳定遗传,在不同世代中其抗性均未表现出明显减弱或者衰退,且其抗药性和拮抗性也未因在水稻植株体内定殖而消失。应用RAPD分子技术分析了不同转管培养的无性系菌株间的遗传相似性,结果表明诱变菌株的不同无性系世代间基本一致,而与原始菌株T2-16存在差异。本论文还对木霉菌在水稻体内定殖动态进行了探索。通过以传统的内生菌分离技术与对水稻内生真菌ITS1-5.8S rDNA-ITS2的部分基因序列的扩增,测序和序列比对,证明经过哈茨木霉突变体TUV-13浸种处理后,水稻幼苗期的根、茎以及叶片中均有抗药性标记的木霉菌存在。这表明通过浸种,木霉菌能够定殖于水稻植株体内。同时,本论文还比较了突变体TUV-13定殖于不同水稻品种后对种子活力的作用效果,结果表明木霉菌对水稻种子活力的影响存在差异性。这种作用效果的差异性与不同杂交水稻组合间遗传差异性不存在对应关系。本研究结果对拓宽生防木霉菌的用途,确定木霉菌与水稻互作时诱导水稻抗病性以及促进水稻生长的机制,均具有重要作用。
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