自1981年发现第一例病例以来,艾滋病(AIDS)一直以惊人的速度在全球蔓延,成为世界上危害人类健康最严重的病毒性疾病,迫切需要研制安全、有效、价廉的艾滋病疫苗预防艾滋病病毒(HIV)的传播,或降低HIV病毒载量,延缓HIV感染者发病。艾滋病疫苗必须通过科学设计的临床试验,考察其安全性、免疫原性及保护性。随着人类对艾滋病认识的不断提高,越来越多的证据显示阳性CD8介导的CTL在控制艾滋病毒感染中起举足轻重的作用,有效地诱导针对HIV-Gag等较保守区域的CTL是设计有效的艾滋病疫苗重要手段。另一方面,诱导产生有效的中和抗体是一个疫苗成功与否的重要指标,也是十几年来艾滋病疫苗研究的主攻方向之一,这是因为中和抗体的产生在阻止病毒感染过程中起着关键的作用。本研究首次利用两种质粒共转染的方法,成功构建并筛选出了高效、持续表达HIV-1结构蛋白Gagpol和Env的哺乳动物细胞株,监测了细胞培养基中病毒样颗粒(virus like particles,VLPs)的分泌情况,分离纯化后确立了成品的质量控制标准,检测了VLPs诱导小鼠机体产生细胞免疫的能力和中和抗体的水平,同时完成了HIV-1病毒样颗粒疫苗初步的安全性评价。结果表明:①获得的高效表达HIV-1结构蛋白Gagpol和Env的重组293细胞系能够持续分泌两种目的蛋白;②分泌在培养上清中的目的产物经分离纯化后,透射电镜观察其能够组装成病毒样颗粒(VLP);③该病毒样颗粒能够诱导机体产生良好的体液免疫和细胞免疫水平;④安全性评价表明,HIV-1病毒样颗粒疫苗无明显的毒副作用。