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目的:肺动脉高压(pulmonary artery hypertension,PAH)是由多种病因引起的肺血管受累,肺动脉阻力进行性增加导致肺动脉压力增高,进而使右心室收缩压升高和右心肥厚,最终引起患者右心衰竭而死亡的一类疾病。PAH诊断困难、治疗棘手且预后差,严重威胁人类健康。尼可地尔(Nicorandil)是一种KATP通道开放剂,己被证实有抑制肺动脉平滑肌细胞增殖的效应。本实验以野百合碱(monocrotaline,MCT)诱导的肺动脉高压小鼠为研究对象,观察尼可地尔对肺动脉高压小鼠肺血管重构的影响。方法:18只CD1雄性小鼠随机分为对照组、野百合碱组、野百合碱+尼可地尔组,每组6只,后2组给予野百合碱(400mg/kg)皮下注射,每周1次,连续8周,制备肺动脉高压模型,治疗组每日给予尼可地尔(10.5mg/kg)灌胃。8周后通过直接经膈肌右心室穿刺法测定右心室收缩压;称重法计算右心肥厚指数:HE染色观察右室心肌细胞形态;弹力纤维染色测定肺小动脉中膜厚度;免疫组化检测肺动脉平滑肌细胞α-肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)表达并计算肺小动脉肌化程度。结果:野百合碱模型组小鼠右心室收缩压(33.45±1.37mmHg)(right ventricular systolic pressure,RVSP)较对照组(23.43±2.32mnmHg)显著增高(P<0.01),右心肥厚指数(0.27士0.03)较对照组(0.24士0.02)显著升高(P<0.05),而尼可地尔能显著降低野百合碱诱导的小鼠RVSP升高(27.12±2.06mmHg vs模型组33.45±1.37mmHg,P<0.01)和右心肥厚(0.24±0.01 vs 0.27±0.03,P<0.05);野百合碱模型组肺动脉中膜厚度(11.06±0.80%)较对照组(3.89±0.61%)显著增加(P<0.01),而尼可地尔能减轻肺小动脉中膜增厚(5.31±0.51%vs模型组11.06±0.80%,P<0.01);野百合碱模型组部分肌化血管比例(36.01±8.68%vs对照组25.64±6.63%,P<0.05)和完全肌化血管比例(57.79±9.51%vs对照组15.94±5.63%,P<0.01)显著升高,而非肌化血管比例下降(6.11±1.70%vs对照组58.41±8.01%,P<0.01);尼可地尔能抑制肺小动脉完全肌化(42.76±4.11%vs模型组57.79±9.51%,P<0.01),而部分肌化血管比例较模型组增多(47.31±4.61%vs36.01±8.68%,P<0.05);尼可地尔能减轻野百合碱诱导的右心心肌细胞损伤。结论:尼可地尔能通过抑制肺小动脉重构减轻野百合碱诱导的肺动脉高压,其可能成为一种能有效防治肺动脉高压的药物。目的.:肺动脉高压是一种以肺阻力和肺动脉压力进行性升高为病理生理基础的临床综合征。肺血管重构是PAH的特征性病理改变,包括内膜损伤和修复,中膜增厚及外膜炎症细胞浸润。其中外膜炎症和肺血管重构是互相依存的,炎症细胞浸润进一步促进了 PAH的发生。肥大细胞(Mast cells,MCs)是介导免疫反应的重要细胞,其分泌的许多活性物质,如组胺、白三烯、白介素-3(IL-3)、蛋白水解酶、转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)等细胞因子,使炎症细胞浸润,并使血管发生纤维化,参与和调节肺血管重构过程。本实验以野百合碱诱导的肺动脉高压大鼠模型为研究对象,观察MCs在肺血管重构过程中时空分布的变化。方法:SD雄性大鼠40只,随机分为对照组和野百合碱模型组(4个时间组),每组8只,对照组给予生理盐水0.8ml腹腔注射,模型组给予野百合碱60mg/kg腹腔注射,分别在第3、7、14、28天选取模型组大鼠处死,称重法计算右心肥厚指数;HE染色观察肺组织中膜厚度和计算心肌细胞横截面积;弹力纤维染色测定肺小动脉中膜厚度和观察MCs分布;甲苯胺蓝染色观察并计算MCs时空分布数量特征;天狼星红染色观察心脏纤维化程度:免疫组化检测肺动脉平滑肌细胞 α-肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、类胰蛋白酶、S100A4和CD68表达及分布特征,并以此计算肺小动脉肌化程度、肥大细胞和单核巨噬细胞浸润程度。结果:野百合碱造模第14天和第28天右心肥厚指数较对照组显著增高(0.32±0.04,0.57±0.06 vs 0.25±0.02,P<0.05),心肌细胞横截面积第 28 天与对照组相比显著增加(334.1±38.5um2 vs 203.3±27.4um2,P<0.05),第 28 天右心纤维化程度明显增加(12.14±5.94%vs 1.44±0.57%,P<0.05)。弹力纤维染色结果示第28天肺小动脉中膜厚度与对照组相比差异有统计学意义(0.58±0.10 vs 0.24±0.02,P<0.05)。ct-SMA免疫组化结果示第28天肌化血管密度较对照组显著升高(3.25±0.86vs0.97±0.18,P<0.05)。S100A4免疫组化染色结果示,肺小动脉S100A4表达随时间呈上升趋势,第28天达到峰值。第28天有大量MCs分布于肺泡间隔内(34.00±11.27cells/mm2 vs 0.06±0.14cells/mm2,P<0.05),肺小动脉内也有大量 MCs 浸润(5.86±1.86cells/vessel vs 0.04±0.09cells/vessel,P<0.05),同时MCs未脱颗粒数量较对照组显著减少(31.24±2.87%vs 98.76±3.04%,P<0.05)。第14天CD68+巨噬细胞开始分布于肺小动脉(5.82±1.46cells/vessel vs 0.98±0.14cells/vessel,P<0.05)和肺泡间隔内(7.56±1.37 cells/mm2 vs 0.96±0.12cells/mm2,P<0.05),而第 28 天 CD68+巨噬细胞大量分布于肺小动脉(7.68±1.63cells/vessel vs 0.98±0.14cells/vessel,P<0.05)和肺泡间隔内(23.27±5.35cells/mm2 vs 0.96±0.12cells/mm2,P<0.05)。类胰蛋白酶免疫组化结果示,第28天分布于肺小血管和肺泡间隔内胰蛋白酶阳性的MCs数量分别是 5.87±1.67cells/vessel 和 24.17±4.78cells/mm2,较对照组(0.25±0.04cells/vessel和0.18±0.06cells/mm2)有统计学差异(P<0.05)。右心TB染色结果示,MCs时空分布无统计学差异(P>0.05);与对照组相比,右心组织中CD68+巨噬细胞和类胰蛋白酶阳性的MCs时空分布均无统计学差异(P>0.05)。结论:野百合碱PAH大鼠模型肺小动脉和肺泡间隔内有大量MCs浸润,且MCs脱颗粒率显著升高。CD68+巨噬细胞表达上调先于肥大细胞,提示肥大细胞浸润可能受CD68+巨噬细胞调控,两者共同参与肺血管重构。