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目的:
本实验通过观察维脑路通、精氨酸对结肠吻合口愈合的影响,研究吻合口愈合的促进因素。
方法:
选用体重200~250g雄性wistar大白鼠15只,所有动物都喂以标准实验大鼠全价颗粒饲料,自由饮水,适应实验室环境一周后进入实验。随机分为三组,每组5只,所有大鼠术前、术后各肌注青霉素40万单位。以10%水合氯醛(0.3ml/100g)腹腔注射麻醉。维脑路通组:行右半结肠切除,回肠—横结肠端端吻合,用6/0无损伤线,肠吻合口单层内翻结节缝合4针,用4万单位/100毫升的庆大霉素盐水2毫升冲洗腹腔,用3/0丝线连续缝合关腹,术后24小时开始自由进食、水,以维脑路通(15mg/kg/d)灌胃,连续3天;精氨酸组:手术方法同前,术后24小时开始自由进食、水,以精氨酸(800mg/kg/d)灌胃,连续3天。对照组:手术方法同前,术后24小时自由进食、水,不行任何处置,术后4天分别处死,进行剖腹探查。检查吻合口愈合情况,无渗漏者,游离结肠吻合段、切取4厘米(吻合口在节段的中央),置于林格液中,行吻合口的爆破压力测定:将肠段的一端与压力测试仪连接,另一端缝接导管。导管另一端连接注射泵,以2ml/min的速度向肠段内泵入亚甲蓝注射液,同时监测腔内压力。当发生亚甲蓝注射液泄漏的腔内压力为吻合口的爆破压力,做以记录。这个参数表明吻合口的机械强度(单位mmHg)。再行吻合口羟脯氨酸含量测定:将爆破压力测量后、切除带有吻合口的1cm肠段100mg,称重,脱脂,脱水,加6mmol/L盐酸110度水解12小时,使所有氨基酸间肽键全部断裂,取样后氧化,加入羟脯氨酸显示剂(10%过二甲氨基苯甲醛溶液)用紫外分光光度仪测定组织的羟脯氨酸含量。以微克羟脯氨酸每毫克组织(μg/mg)方式作为结果的计数.病理学检查:取吻合口处肠管至于10%中性甲醛中固定,常规石蜡包埋,切片厚度(4μm),苏木精-伊红染色,行光镜检查胶原细胞及纤维,比较组间差异。
结果:
术后4天,见各组均无吻合口瘘发生,可以完成测压,精氨酸组、维脑路通组和对照组吻合口爆破压力分别为59.800±3.033mmHg、31.200±2.588mmHg和25.200±1.923mmHg三组间两两比较,均存在明显统计学差异(P<0.01);精氨酸组、维脑路通组和对照组吻合口组织羟脯氨酸含量分别为6.053±0.227μg/mg,4.420±0.671μg/mg和4.092±0.179μg/mg,三组间两两比较,也存在明显统计学差异(P<0.01),光镜下(10或20倍)观察见对照组吻合口胶原细胞及胶原纤维少,维脑路通组相对增多,精氨酸组胶原纤维增加明显。
结论:
维脑路通、精氨酸可以通过增加吻合口组织的羟脯氨酸含量(既胶原细胞及胶原纤维的量),促进结肠吻合口的愈合,精氨酸促进愈合效果更强。