抑癌基因CHD5在胃癌中的表达及其临床意义

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背景与目的胃癌(gastric cancer)是消化道最常见的恶性肿瘤之一,在我国乃至世界范围内都有很高的发病率和死亡率。众所周知,肿瘤的发生发展是多基因、多步骤协同作用的生物学行为,在对肿瘤的研究中,人们逐渐接受这样一个观点:原癌基因的激活和抑癌基因的失活对其发生作用巨大。近年来,虽然胃癌的发病率较以前略有下降,胃癌的早期诊断较以前有所提高,但是胃癌的疗效仍然较差。因此,针对胃癌的基因学研究,找到胃癌新的诊断和治疗靶点,是一项非常重要并且有重要实验和临床意义的工作。近些年来,大量的研究表明:人类染色体1p36区在人类多种肿瘤尤其是在恶性肿瘤的患者中均出现表达缺失,提示该区域内存在一个或者多个重要的的候选抑癌基因。其中染色体质域解螺旋酶DNA结合蛋白5(chromodomain helicase DNA-binding protein5, CHD5)是于2003年由Brodeur实验室新发现的位于该区域内的抑癌基因。2007年Bagchi等运用染色体基因工程技术,在对小鼠模型的研究中证明染色体质域解螺旋酶DNA结合蛋白5是一种抑癌基因,其在肿瘤的发生、发展过程中发挥着重要作用。此后,针对该基因的研究越来越受到关注,人类多种癌症中关于CHD5的研究相继展开。但是在有关胃癌与CHD5的研究仍不多见,因此CHD5与胃癌发生发展的关系仍有待大量的科学研究去进一步探讨。在本研究中,本科研小组采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术和免疫组织化学方法(链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法,streptavidin-perosidase method),分别检测63例胃癌组织及相应癌旁组织(距癌5cm)中CHD5mRNA和蛋白的表达情况,并分析胃癌组织中CHD5mRNA和蛋白的表达与临床病理特征之间的关系。通过研究抑癌基因CHD5在胃癌发生、发展及转移侵袭等相关生物学行为中的作用,以期为胃癌的早期诊断及临床治疗提供重要的参考依据。材料与方法1.63例胃癌及其相应癌旁组织(距癌5cm)分别取自2010年12月至2012年02月郑州大学第一附属医院医院胃肠外科手术切除的标本。所有标本均经病理科常规病理检查并证实为胃癌及癌旁正常组织。所有标本来源患者知情同意并且术前均未行化疗、放疗及其他免疫治疗。标本放入液氮后保存于一80℃低温冰箱中。2.应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术及免疫组织化学方法(链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法,streptavidin-perosidase method)检测胃癌组织及相应癌旁组织中CHD5基因mRNA和蛋白的表达。3.所有实验数据均采用SPSS17.0统计软件进行统计分析。对胃癌组织和癌旁组织中的CHD5mRNA灰度值进行配对t检验。相关性分析采用配对四格表的关联性分析。对临床病理因素间的关系进行x2检验。以P<0.05作为差异有统计学意义的检验标准。结果1.在63例胃癌组织中CHD5mRNA的表达量相对值为(0.06±0.04),明显低于其在癌旁组织中的表达相对值(0.34±0.06),(t=59.204,P<0.01)。数据经分析发现,CHD5基因mRNA的表达与患者的肿瘤分化程度、淋巴结转移与否及肿瘤TNM分期有关(均P<0.05)。2.在胃癌组织及其相应的癌旁组织中CHD5基因的蛋白表达阳性率分别为36.5%(23/63)和71.4%(45/63),并且在癌旁组织中CHD5基因的蛋白多为弱阳性表达。经统计学分析发现,CHD5蛋白的表达与患者肿瘤分化程度、淋巴结转移与否及肿瘤TNM分期有关(均P<0.05),与患者性别、年龄、肿瘤大小远处转移无关。3.在所研究的63例胃癌组织中,CHD5基因的mRNA和蛋白的表达具有相关性(P<0.01)。结论1.CHD5基因mRNA在胃癌组织中表达明显下调或者表达缺失,并且与患者的肿瘤分化程度、淋巴结转移与否及肿瘤TNM分期有关。在相应癌旁组织中表达正常或者高表达。这些提示CHD5基因在胃癌的肿瘤学行为中可能起着非常重要的作用。2.本研究发现在胃癌组织中,CHD5基因的表达与患者肿瘤分化程度、淋巴结转移与否及肿瘤TNM分期有关,针对该蛋白的检测有希望成为胃癌早期检测及评判胃癌生物学行为的指标之一。3.胃癌组织中,CHD5基因的mRNA的表达缺失常伴随着CHD5蛋白的表达缺失,两者有相关性。
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