5种血清microRNA作为胃癌诊断标志物的研究

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背景:microRNA (miRNA)是一种长约19到23单位的内生性的微小RNA,它通过与靶信使RNA的3’UTR的特异性结合从而调节靶基因的表达。大量的实验证明了在肿瘤的发生发展中miRNA发挥了重大的作用。在近几年以来,随着在血清发现了稳定存在的miRNA, miRNA的研究聚焦在血清miRNA与疾病的关系上。通过对患者和正常血清miRNA的检测和对比后,发现了一批可以用于肿瘤临床检测的miRNA.作为新的检测生物标志物,血清miRNA具有方便、快捷以及较高的准确性等优点,甚至可以区分在临床很难诊断的早期肿瘤,诸如非小细胞肺癌、胃癌以及胰腺癌。由于缺乏胃癌的非侵入检测手段,患有胃癌的病人很难被预测。本研究的目的是以找出可以作为新型诊断生物标志物的血清miRNA表达谱,并评估其在监测疾病进展及其临床应用中的作用。方法:实验所使用血清标本取自164例胃癌患者的血清标本和127例年龄和性别匹配的正常人。一个初步的血清miRNA表达谱的solexa测序所使用血清样本是分别从20名病人和20名正常人中取得的。复筛阶段是通过探针法利用qRT-PCR技术测定复筛组(22例胃癌患者vs22例正常人)的个体样本血清。最后在由142例胃癌患者和105例正常人血清样本组成验证组中通过探针法利用qRT-PCR技术测定确认上面确认的结果。个人样本的表达差异使用水解探针为基础的茎环定量逆转录聚合酶链反应(QRT-PCR)技术进行了验证,这些样本被安排在了两个阶段。结果:Solexa测序结果表明19种血清miRNA相对于正常人来说胃癌患者的血清中明显增高。通过qRT-PCR检测表明5种血清miRNA(miR-1, miR-20a, miR-27a, miR-34andmiR-423-5p)可以作为胃癌诊断的生物标记物。分析结果表明5种血清miRNA的表示水平与肿瘤阶段相关联。这5种血清miRNA的血清样本的ROC曲线下方面积分别是0.879(95%可信区间(CI)0.822-0.936)和0.831(95%C10.767-0.898),这明显高于在癌胚抗原(CEA)(0.503)和糖类抗原19-9(CA19-9)(0.600)这两个生物标志物。结论:我们通过全基因组表达谱中识别到5种可以诊断胃癌的血清miRNA。这些作为生物标志物的血清miRNA表达水平也说明了肿瘤发生发展阶段。
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