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目的：观察比较不同浓度烟草烟雾提取物(Cigarette Smoke Extract, CSE)对人牙龈成纤维细胞(Human Gingival Fibroblasts, HGFs)在3mo1%氧化钇作为稳定剂的四方氧化锆多晶体陶瓷(3Y-TZP)种植材料表面黏附、增殖、形态伸展及细胞状态的影响。方法：1.采用改良胰酶消化结合玻片覆盖组织块法,体外进行人牙龈成纤维细胞原代培养,倒置相差显微镜下观察细胞的形态学特征,每天平均OD值法绘制牙龈成纤维细胞生长曲线；2.采用免疫组化SP法(波形丝蛋白和角蛋白免疫细胞化学染色)进行人牙龈成纤维细胞来源鉴定；3.SRB法分别检测0,2.5%,5.0%,10%及20%CSE作用12h后人牙龈成纤维细胞在3Y-TZP表面黏附情况4.SRB法分别检测0,2.5%,5.0%,10%及20%CSE作用24h,48h,72h后人牙龈成纤维细胞在3Y-TZP表面增殖情况；5.0,2.5%,5.0%,10%及20%CSE作用24h前后,分别进行免疫荧光染色,采用病理图像分析系统计数评价人牙龈成纤维细胞细胞在3Y-TZP表面铺展面积及形状系数的改变；6.0,2.5%,5.0%,10%及20%CSE作用24h前后,激光共聚焦显微镜下观察拍照,观察凋亡形态：7.0,2.5%,5.0%,10%及20%CSE作用24h前后,扫描电镜观察拍照,比较细胞黏附形态结构的改变。结果：1.改良胰酶消化结合玻片覆盖组织块法能够成功原代培养人牙龈成纤维细胞；2.SP免疫组化结果显示,细胞抗波形丝蛋白染色阳性,抗角蛋白染色阴性,证明细胞为中胚层来源,且无上皮源性细胞混杂,阴性对照组均未见阳性染色结果；3.人牙龈成纤维细胞的生长曲线显示,在接种后24h内,细胞数量有所减少,48h后,细胞数目逐步平稳,2-3d后开始加速增殖,逐渐进入对数增殖期,6-7d时,细胞数目值达到高峰,8-9d进入细胞增长平台期,曲线呈现S形,细胞的倍增时间约为80h；4.CSE对人牙龈成纤维细胞在3Y-TZP表面粘附的影响SRB结果显示,不同浓度CSE作用12h,各实验组OD值降低,与对照组间均存在显著差异(P<0.05),抑制作用随浓度升高更加明显,呈浓度依赖性：5.CSE对人牙龈成纤维细胞在3Y-TZP表面增殖的影响CSE(2.5%-20%)可抑制人牙龈成纤维细胞的增殖,抑制的程度随着浓度的升高而加强(P<0.05)；6.不同浓度CSE对人牙龈成纤维细胞在3Y-TZP表面铺展的影响不同,随着CSE浓度升高,细胞铺展面积减小,实验组与对照组间存在显著性差异(P<0.05)。随着CSE浓度升高,形状系数Sf呈下降趋势(P<0.05)；7.激光共聚焦显微镜下显示对照组细胞核为均匀圆形或椭圆形黄绿色荧光,无缺损或破坏；各实验组随着浓度升高,细胞形态变化明显。中低浓度CSE(2.5%,5.0%,10%)引发细胞凋亡,可见致密浓染的黄色荧光碎片,出现染色质固缩、核边缘化和凋亡小体等；高浓度CSE(20%)引起细胞坏死,黄荧光减弱甚至消失。8.扫描电镜显示对照组细胞呈纺锤形,轮廓清晰,表面微绒毛密度高,有伪足样突起相互融合,紧密贴附并沿材料表面生长；低浓度组(5%)材料表面细胞逐渐变为卵圆形,微绒毛密度降低；随着CSE浓度升高(10%),出现细胞变圆,形态不规则,伪足收缩,表而微绒毛减少,细胞周缘突起减少等改变,部分细胞仅一侧黏附于材料,另一侧翘起。结论：CSE对人牙龈成纤维细胞在3Y-TZP种植材料表面的生长可产生明显抑制作用,且呈现出浓度依赖性。提示吸烟对陶瓷种植体植入后的软组织界面产生不良影响,其损害程度可能与烟草有害物质的接触量有相关性。