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该研究拟利用分子生物学技术构建鸡CaBP-D28k的真核表达质粒,在鸡体内进行表达并以此来对禽体内钙的营养调控机制进行研究,并进一步寻找利用基因注射来解决生产中由于钙的营养不足而引起的各种缺乏病的可行性.该研究是对CaBP-D28k作用的初步探讨,旨在为CaBP-D28k的进一步研究、开发奠定基础,通过RT-PCR的方法从蛋鸡小肠组织RNA扩增出789bp完整的鸡CaBP-D28kcDNA.通过TA克隆,我们将所扩增的cDNA克隆入载体pGEM-T内,经酶切和PCR初步鉴定后,再测定分析其序列的正确性.为了验证克隆的鸡CaBP-D28k cDNA的编码情况,该研究通过将鸡CaBP-D28k cDNA亚克隆入真核表达载体pCEP4内,构建了真核表达构件pCEP4-CaBP-D28k,用所获得的真核表达构件pCEP4-CaBP-D28k转染COS-1细胞,进行暂态表达,用免疫荧光法检测到表达产物.用真核表达构件pCEP4-CaBP-D28k注射老年蛋鸡,经血液中降钙素、甲状旁腺素、雌二醇和血钙血磷的测定分析,检验重组真核表达质粒在蛋鸡体内的表达情况.