【摘 要】
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水稻二化螟(Chilo suppressalis Walker)是亚洲水稻种植区最具破坏力的害虫之一,而化学防治一直占据着螟害治理的主导地位。近年来,部分寄生蜂在害虫防治中的商业化应用,让生物防治优势逐渐凸显。因此,化学杀虫剂对寄生性天敌的潜在影响需要高度重视。为了明确氯虫苯甲酰胺对二化螟及其优势寄生蜂的选择性原理,本文统计了2019~2021年四川稻区越冬代二化螟寄生蜂的种类、比例和寄生率,并确
【基金项目】
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国家重点研发项目“华南及西南水稻化肥农药减施技术集成研究与示范(2018YFD0200300)”; 四川省科技厅重点研发项目“四川稻区二化螟抗药性监测、抗药性分子快速检测技术及绿色防控体系构建与示范(2022YFN0044)”;
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水稻二化螟(Chilo suppressalis Walker)是亚洲水稻种植区最具破坏力的害虫之一,而化学防治一直占据着螟害治理的主导地位。近年来,部分寄生蜂在害虫防治中的商业化应用,让生物防治优势逐渐凸显。因此,化学杀虫剂对寄生性天敌的潜在影响需要高度重视。为了明确氯虫苯甲酰胺对二化螟及其优势寄生蜂的选择性原理,本文统计了2019~2021年四川稻区越冬代二化螟寄生蜂的种类、比例和寄生率,并确定了优势种。同时,测定了7个二化螟田间种群对5种杀虫剂的抗药性水平,评估了氯虫苯甲酰胺对优势蜂的直接影响,从解毒代谢和靶标位点两个方面分析了二化螟及优势蜂对氯虫苯甲酰胺存在敏感性差异的可能原因。主要研究结果如下:1.三年间四川7地越冬二化螟种群的被寄生率分别为6.28%~11.78%,0.81%~5.50%,0.88%~14.34%,其中兴文和崇州种群的被寄生率相对稳定。结合形态和分子鉴定结果,共收集到8种越冬代二化螟寄生蜂,分别为螟甲腹茧蜂、稻螟小腹茧蜂、中华茧蜂、螟黄足盘绒茧蜂、大螟钝唇姬蜂、夹色奥姬蜂、趋稻厚唇姬蜂以及绒茧灿金小蜂(重寄生蜂),其中螟甲腹茧蜂和大螟钝唇姬蜂为优势种,最高寄生率分别可达11.45%和4.81%。2.毒力测定结果表明,四川7地二化螟田间种群对三唑磷仍处在中抗水平(17.75~46.09倍);对毒死蜱和杀虫单的抗药性降至敏感—低抗水平(分别为0.48~6.82倍和1.33~5.64倍);对阿维菌素的抗药性上升到了敏感—中等水平(4.68~17.76倍);对氯虫苯甲酰胺比较敏感(0.71~3.76倍)。3.采用药膜法测定了氯虫苯甲酰胺的触杀毒性。结果表明,二化螟和两种优势寄生蜂对氯虫苯甲酰胺的敏感性存在显著差异。敏感品系二化螟的LC50为30.79ng/cm~2,田间种群TJ21的LC50为64.80 ng/cm~2;而螟甲腹茧蜂经46.83 ng/cm~2处理24 h后死亡率达到57.89%,大螟钝唇姬蜂经1873.36 ng/cm~2处理24 h后则全部存活。酶活测定结果表明,大螟钝唇姬蜂中羧酸酯酶(CarE)、谷胱甘肽S-转移酶(GST)、P450多功能氧化酶(P450s)的活性分别为5.25μmol/min·mg·pro、376.51 mmol/min·mg·pro、306.95 pmol/min·mg·pro,均远高于螟甲腹茧蜂和敏感品系二化螟,其中CarE存在显著差异,可能直接参与了大螟钝唇姬蜂的解毒代谢。相同处理剂量下增效剂TPP、DEM和PBO对二化螟无明显影响(存活6 h及以上),但对寄生蜂致死(1 h内全部死亡),且酶活测定结果表明,增效剂不仅没有抑制相应的解毒酶,反而诱导了酶活性的增加。结合转录组,对比分析了不同物种解毒酶基因的相关性,发现CarE对大螟钝唇姬蜂解毒代谢的影响可能更大,而P450s对螟甲腹茧蜂解毒代谢的影响可能更大。4.通过克隆氯虫苯甲酰胺的作用靶标,共获得二化螟鱼尼丁受体(CsRyR)C端序列3711bp,编码氨基酸1236个;螟甲腹茧蜂鱼尼丁受体(CmRyR)C端序列2323bp,并翻译成氨基酸750个;大螟钝唇姬蜂的鱼尼丁受体(EtRyR)C端序列2501bp,翻译成氨基酸829个。经序列比对,鳞翅目昆虫鱼尼丁受体C端特有的氨基酸残基N、N、N、L、L、N、T在寄生蜂中对应D、K、H、I、I、G、Q。两种寄生蜂的Ry R-C端跨膜域TM2~TM3之间均存在一段增加的氨基酸(EtRyR中为SGSGSGGSGIE,CmRyR中为GGSGGI)。此外,在抗性位点I4758M上,敏感二化螟为异亮氨酸(I),而CmRyR和EtRyR与抗性二化螟突变后一致,均为甲硫氨酸(M)。模拟对接结果显示,氯虫苯甲酰胺能与CsRyR和CmRyR产生相互作用,但不能与EtRyR结合。与CmRyR相比,CsRyR和氯虫苯甲酰苯胺之间形成的相互作用力更多。这些结果表明,解毒酶活性和靶标敏感性的差异都可能介导氯虫苯甲酰胺对二化螟和寄生蜂的选择性。为合理使用杀虫剂,延缓害虫抗药性发展,保护优势天敌提供了理论基础。
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