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目的从人乳腺癌原代组织中分离出乳腺癌干细胞,观察乳腺癌干细胞和分化细胞的形态学特点,分析乳腺癌干细胞的数量比例与临床病理参数的关系:探讨ER、 PR、HER2及耐药蛋白P-gp、GST-π、LRP及Topo II在乳腺癌干细胞和分化细胞中的表达及意义。方法选取乳腺浸润性导管癌新鲜标本30例,采用机械分离法将乳腺癌组织块制备成单细胞悬液,通过免疫磁珠两步法从中分离出乳腺癌干细胞(CD44+CD24-/10W细胞)和乳腺癌分化细胞(CD24+细胞和CD44-CD24-细胞),应用免疫细胞化学Envision二步法检测两组细胞ER、PR、HER2、P-gp、GST-π、LRP和Topo Ⅱ的表达情况。结果(1)光学显微镜下,乳腺癌干细胞的和分化细胞形态上无明显差异。(2)乳腺癌组织中CD44+/CD24-/low细胞即乳腺癌干细胞的比例约0.24%-9.70%,平均2.96%。(3)乳腺癌干细胞比例与患者年龄、肿块长径、淋巴结转移及组织学分级均无明显相关性,均P>0.05。(4)乳腺癌干细胞和分化细胞ER、PR及HER2的表达存在显著差异,均P<0.05;乳腺癌干细胞和分化细胞表型构成不同,P<0.05,乳腺癌干细胞以ER-.PR-及HER2-表型为主,约占66.7%,乳腺癌分化细胞以ER和/或PR+、HER2-表型为主,约占43.3%。(5)乳腺癌干细胞P-gp的阳性表达率为73.3%,乳腺癌分化细胞的阳性表达率为40.0%,二者之间差异具有统计学意义,P<0.05;乳腺癌干细胞TopoⅡ的阳性表达率为40.0%,乳腺癌分化细胞的阳性表达率为76.7%,二者之间差异具有统计学意义,P<0.05;乳腺癌干细胞GST-π的阳性表达率为23.3%,乳腺癌分化细胞的阳性表达率为13.3%,二者之间差异无统计学意义,P>0.05;乳腺癌干细胞LRP的阳性率表达率为13.3%,乳腺癌分化细胞的阳性表达率为13.3%,二者之间差异无统计学意义,P>0.05。结论(1)乳腺癌干细胞比例约2.96%,光学显微镜下,与分化细胞形态上无明显差异;乳腺癌干细胞比例与患者年龄、肿块长径、淋巴结转移及组织学分级均无明显相关性。(2)乳腺癌干细胞ER.PR和HER2的表达可以为阳性,也可以为阴性,但以阴性表达为主,其表型与分化细胞不同,以ER-、PR-及HER2-表型为主,可能是内分泌治疗失败的主要原因。(3)与乳腺癌分化细胞相比,乳腺癌干细胞可通过高表达耐药蛋白P-gp,低表达To poⅡ而具有更强的耐药性,可能是乳腺癌化疗失败的关键因素之一。