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落叶松是我国北方主要造林树种,其育种时间长、见效慢及后代性状不能够定向改良等局限性,因此有必要建立快速繁殖体系以达到缩短育种周期、定向改良性状的目的。本研究以成熟合子胚为材料,对杂种落叶松和长白落叶松进行了离体再生及其内源激素含量变化研究,建立了落叶松离体再生体系,为进一步开展落叶松遗传转化研究奠定基础。主要研究结果如下:1.杂种落叶松高效离体再生体系的建立以杂种落叶松(兴10×日13)成熟合子胚为外植体,研究了影响杂种落叶松成熟胚离体再生的多种因素,建立了杂种落叶松高效离体再生体系。结果表明:在光照条件下,BM+2.0 mg·L-1 TDZ最有利于杂种落叶松愈伤组织的诱导,诱导率高达90%以上;BM培养基有利于杂种落叶松不定芽的诱导,诱导率达60.7%,且在BM+1.5 mg·L-1 TDZ条件下诱导率最高为67.73%;BM培养基能促进不定芽增殖,增值系数达4.48,且在BM+1.0 mg·L-1 TDZ条件下增值系数最高为5.23;不定芽在1/2BM+0.5 mg·L-1 TDZ申长比率最高且为205.72%,同时,在1/2BM培养基中添加2 g.L-1的活性炭也能促进伸长;当不定芽在1/2BM+0.05 mg·L-1 6-BA+0.2 mg·L-1 NAA的条件下培养时,抽茎率最高,为73.96%;不定芽在1/2BM+0.5 mg·L-1 IBA+1.0 mg·L-1 NAA条件下诱导生根的生根率最高,为29.85%,再生植株的移栽成活率为62.5%。2.长白落叶松高效离体再生体系的建立以长白落叶松鸡西种源成熟合子胚为外植体进行长白落叶松再生体系的建立及优化研究。采用不同消毒方法、培养基及激素组合研究外植体的消毒、愈伤组织的诱导、不定芽的诱导及增殖;以不同浓度的赤霉素(GA3)和活性炭(AC)研究两者对不定芽伸长的影响;采用试管内及试管外两种生根方式研究不定芽的生根。结果表明,4%NaC10消毒去皮种子15 min,0.5% NaCIO消毒胚2 mmin为最佳消毒方法;BM+2.0 mg·L-1 TDZ时,愈伤组织诱导率最高,达88.9%; BM+1.5 mg·L-1 TDZ时,不定芽诱导率最高,达80.0%; BM+1.0 mg·L-1 TDZ时,不定芽增殖最快,增殖系数为4.98;GA3对不定芽的伸长有毒害,2.0 g.L-1活性炭对不定芽伸长促进作用明显,且伸长比率达261.76%;1/2BM+0.5 mg·L-1 IBA+1.0 mg·L-1 NAA为试管内生根的最佳组合,生根率达26.09%,不定芽在750 mg·L-1 NAA中蘸取25s试管外生根率最高,达37.14%。3.落叶松离体培养过程中内源激素含量变化研究应用高效液相色谱与质谱联用方法(HPLC-MS/MS)研究了杂种落叶松和长白落叶松植株再生过程中内源激素的含量变化。结果表明:杂种落叶松与长白落叶松内源ABA、IAA含量均较高,且变化幅度较大,并且IAA含量总体表现出高-低-高的变化规律;而内源ZT及GA3含量相对较低,但其在不定芽生长过程中的不同阶段含量变化明显。杂种落叶松与长白落叶松内源激素含量变化的差异与其遗传特性有关;IAA是落叶松植株再生过程中不可缺少的内源激素之一,ZT、GA3具有促进落叶松生长及分化的作用。