论文部分内容阅读
目的:本实验采用气管滴注的方式建立SD大鼠的大气细颗粒物损伤模型,以原花青素作为干预物,观察其对模型心肌损伤的保护作用,并在此基础上探讨可能的机制。了解原花青素对大气细颗粒物所致SD大鼠心肌损伤的保护作用,并探讨其可能的机制,为从膳食营养的角度预防大气污染下机体的损伤提供科学依据。方法:选取48只雄性SD大鼠,体重为150-180g,将其随机分为6组,每组8只,分别为空白组(C组)、阴性对照组(NS组)、PM2.5染毒组(PM组)、PM2.5+原花青素组(原花青素分低、中、高三个剂量分别为L组、M组、H组)。阴性对照组及PM2.5染毒组自实验开始给予10ml/kg蒸馏水灌胃,PM2.5+原花青素组中低中高剂量分别给予50mg/kg,100mg/kg,200mg/kg原花青素水溶液灌胃,一周后,除阴性对照组之外,其他各组均以剂量为10mg/kg的PM2.5悬浊液经大鼠气管滴注染毒,滴注体积为1ml/kg体重,每隔48小时滴注1次,共3次,阴性对照组给与相同体积的生理盐水经气管滴注,原花青素组在每次PM2.5悬浊液滴注后1h灌胃。染毒结束继续以原花青素干预1周后处死大鼠,空白组不作任何处理,同期处死。用光镜观察大鼠心脏切片形态,使用荧光显微镜检测心肌组织中活性氧(ROS)的强度,使用试剂盒检测组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量,使用蛋白质印迹法(Western Blot)检测心肌组织中蛋白激酶B(Akt),磷酸化蛋白激酶B(p-Akt),B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax),含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)表达水平。结果:1.光镜下观察,阴性对照组及原花青素组心肌细胞形态基本正常,未见毛细血管充血,未见明显炎症细胞浸润。PM2.5组可见部分毛细血管扩张充血,血管周围淋巴细胞浸润。提示PM2.5染毒可使心肌细胞毛细血管充血,炎症细胞增多,原花青素干预组毛细血管扩张充血情况得到改善,炎症细胞减少,与阴性对照组相似。2.荧光显微镜下观察,PM2.5组荧光强度明显高于阴性对照组及原花青素干预组。经检测阴性对照组及原花青素干预组MDA含量低于PM2.5染毒组,且两组间有统计学差异。心肌组织中SOD及GSH-Px的活力在阴性对照组及原花青素组高于PM2.5染毒组,且两组间有统计学差异。3.Western blot结果发现,PM2.5染毒组中Bax,Caspase-3表达水平上升,原花青素治疗组蛋白表达下降。PM2.5染毒组中p-Akt/Akt及Bcl-2蛋白表达下降,给予原花青素的干预组蛋白表达上升。结论:1.原花青素具有保护大气细颗粒物所致大鼠心肌损伤的作用;但原花青素剂量的增加并未显著提升保护作用。2.原花青素保护由PM2.5介导的SD大鼠的心肌组织凋亡及损伤可能是通过Akt/Bcl-2/Bax/caspase-3通路。