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Wulff及其同事在1972年首先建立了通过合成特定的大分子选择性的识别结合位点这种实验方法,后来被称为分子印迹技术。最近几年来,分子印迹技术在诸多刊物上发表,其研究领域从印迹材料的基础研究到潜在的实际性应用,可以说是获得了突飞猛进的发展。17β-雌二醇,做为一种雌激素,对人类和动物的内分泌系统有着较强的影响。我们拟采用分子印迹技术来分析不同溶剂和复杂样品中17β-雌二醇的浓度。首先我们采用甲基丙烯酸做为功能单体成功合成了能够识别17β-雌二醇的非共价键结合的分子印迹聚合物。由于近年来对分子印迹聚合物的形态研究受到越来越多的重视,尤其是单分散的分子印迹微球由于它有特殊的结合点,加上高效的识别能力,方便的使用以及简易的功能设计,所以越来越受到分子印迹合成者的推荐,因此我们采用了该项技术成功合成了微球状分子印迹聚合物,经鉴定合成后的微球的直径介于300nm 到400nm之间,这比相关文献报道的要小很多。本文通过丹磺酰氯与17β-雌二醇的反应,成功合成出17β-雌二醇荧光标记物,分子印迹聚合物根据荧光标记物的荧光发射强度因而具备了荧光特性。由再结合实验可知所合成的MIP在乙腈溶剂中的结合常数是3.17×106M-1,最大结合量是9.98μmol/g。以上实验证明采用荧光特性分子印迹聚合物技术在不同有机溶剂中对17β-雌二醇进行半定量检测具有非常大的可行性。
然后我们尝试了四种溶剂:甲醇,去离子水,乙腈和二氯甲烷对分子印迹聚合物进行检测。分子印迹微球聚合物在不同极性溶剂中对17β-雌二醇荧光标记物的结合常数大小顺序为:乙腈>甲醇>水>二氯甲烷,其结合量的差异并不显著,平均值为9.74μmol/g。这再次表明合成的MIP的稳定性及高效性。我们还尝试了将人体尿样做为研究介质,并成功的得到了MIP在其中的功能参数。结果显示MIP在尿样中的结合量和结合常数和在去离子水中比较相似。这一研究为复杂介质中17β-雌二醇的快速简便的检测提供了理论和方法学的依据。