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癫痫是一种常见病，以脑部神经元过度发放所致的突然、反复和短暂的中枢神经系统功能失常为特征。对癫痫患者进行各种药物治疗后，仍有20-30％的病人未能得到有效控制。大量研究表明，这可能与患者的药物耐受基因有关。本课题通过分子流行病学方法，研究MDR1和MRP2基因多态性在癫痫患者中的分布及其与耐药的相关性，以及该多态性与卡马西平、丙戊酸钠药物剂量和血药浓度的关系。本研究主要由三部分构成。第一部分MDR1 C3435T、MRP2 C3972T多态性在癫痫患者的分布及其与癫痫耐药的关系目的：观察多药耐药基因MDR1 exon26 C3435T和MRP2 exon28 C3972T多态性在癫痫患者中的分布特点，并探讨其与癫痫耐药的相关性。方法：以常规酚-氯仿方法提取患者外周血DNA，分别以PCR-RFLP法和荧光定量PCR法检测MDR1基因exon 26 C3435T的多态性和MRP2基因exon 28C3972T的多态性。应用病例对照研究，分别分析两个基因多态性在癫痫患者中的分布特点，并探讨其与癫痫耐药的相关性。结果：MDR1 C3435T存在CC、CT和TT三种基因型，它们在总人群的频率分布分别为24.5％，59.5％和16.0％；258例癫痫患者与371例正常对照的该多态性的分布无差异(p=0.124)。MRP2 C3972T存在GG和GA两种基因型，在总人群的频率分布分别为64.8％和35.2％；246例癫痫患者和399例正常对照该多态性的分布无差异(p：0.437)。MDR1 C3435T多态性方面：141例耐药组患者和117例控制组患者中，耐药组的CC基因型频率明显高于控制组，TT基因型的分布频率明显低于控制组；CT基因型的分布频率略低于控制组，差异有统计学意义(p=0.001)。MRP2 C3972T多态性方面：135例耐药组患者和111例控制组患者的两种基因型分布未见差异(p=0.587)；但在数值上显示，GG基因型在耐药组频率略高于控制组，GA基因型分布略低于控制组。多因素Logistic回归分析显示，MDR1 C3435T的CC基因型是患者发生耐药的独立危险因素，在平衡了“年龄”、“性别”、“部分性发作”、“复合性发作”、“首发年龄”和“首发与开始服药时间间隔”这六个危险因素后，CC基因型发生耐药的危险性为TT基因型的3.761倍(OR=3.761，p：0.002，95％CI：1.632-8.667)。CT基因型发生耐药的危险性介于CC型和TT型之间，CT基因型发生耐药的危险性为TT基因型的1.488倍(OR=1.488，p：0.271，95％CI：0.734-3.016)。在平衡上述危险因素后，MRP2的GG基因型发生耐药的危险性为GA基因型1.174倍，差异无显著性(OR=1.174，p=0.589，95％CI：0.655-2.104)。“部分性发作”是耐药的独立危险因素。结论：癫痫患者中MDR1 C3435T的CC、CT和TT基因型频率分布、MRP2C3972T的GG和GA基因型频率分布与正常对照组均无显著差异。MDR1 C3435T的CC基因型与癫痫耐药相关。未发现MRP2 C3972T的GG基因型与耐药的联系。第二部分不同MDR1 C3435T、MRP2 C3972T基因型癫痫患者的临床疗效随访研究目的：探讨不同基因型对癫痫治疗效果的影响，验证第一部分病例对照研究的结果。方法：应用前瞻性研究，随访不同基因型患者的临床疗效，观察不同基因型患者耐药发生率的差异，并计算不同基因型患者发生耐药的相对危险度。结果：MDR1 C3435T的CC、CT和TT型组患者的耐药率和控制率具有显著性差异(p：0.01)。CC型组患者的耐药率为40.0％，高于CT型组(20.2％)和TT型组(16.7％)。MRP2 C3972T的GG型组的耐药率为26.3％，略高于GA组(23.3％)，但无显著差异(p=0.670)。Cox回归分析显示，在平衡“年龄”、“性别”、“部分性发作”和“复合性发作”后，MDR1 C3435T的CC基因型发生耐药的相对危险度为CT型的1.735倍(RR=1.735，p：0.077，95％CI：0.943-3.194)，为TT型的2-879倍(RR=2.879，p：0.031，95％CI：1.101-7.530)。未发现MRP2 C3972T的GG基因型对耐药的发生存在影响。结论：CC基因型患者可能更易于发生耐药，TT基因型患者可能更易于控制有效，CT基因型患者则介于两者之间。第三部分MDR1 C3435T、MRP2 C3972T多态性与癫痫患者卡马西平、丙戊酸钠剂量及血药浓度的相关性目的：比较不同基因型组患者卡马西平(CBZ)和丙戊酸钠(VPA)用药剂量和血药浓度的差异。方法：应用高效液相色谱法和荧光偏振免疫分析方法分别测定CBZ、卡马西平环氧化代谢产物(CBZE)、VPA的血药浓度，分析这两个基因多态性与患者CBZ、VPA剂量及浓度的关系。结果：耐药组患者每公斤体重的CBZ剂量、CBZE浓度和VPA剂量高于控制组，具有统计学差异；耐药组患者每公斤的CBZ浓度高于控制组，而VPA浓度低于控制组，未见显著性差异。在MDR1的不同基因型组比较中，每公斤体重的CBZ剂量，CBZ和CBZE浓度均为CC型最高，CT型居中，TT型最低；VPA剂量为TT型最高，CC型居中并略高于CT型；VPA浓度为CT型最高，CC型居中，TT型最低。以上变量组间比较均无统计学差异。在MRP2的不同基因型组比较中，GG基因型的CBZ剂量高于GA组，CBZ和CBZE浓度低于GA组；VPA剂量和VPA浓度均高于GA组，但未发现统计学差异。结论：MDR1 C3435T不同基因型与CBZ剂量与浓度有关，CC型患者可能需要比TT型患者更高的剂量和浓度，才能达到控制发作的效果。尚未看到MDR1C3435T各基因型与VPA剂量、浓度的相关性。亦未看到MRP2 C3972T的GG型、GA型与CBZ、VPA剂量、浓度间的相关性。