四苯基乙烯基荧光探针的制备及流式细胞仪的改进

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传统的荧光材料在浓度稍高的情况下,会产生荧光猝灭效应。而聚集诱导发光(aggregation-induced emission, AIE)现象却正好与之相反,随着溶质浓度的增加,聚集程度增加,导致发光效应逐渐增强。若使用具有聚集诱导发光效应的新型材料制成荧光探针,除具有良好的发光效应外,还具有易储存,适用范围广等优点。具有聚集诱导发光效应的分子或基团有很多,但其中四苯基乙烯及其衍生物以其优秀的发光性能及其简单的合成路线、低廉的生产加工成本引起了科学家们的广泛关注。本课题组以四苯基乙烯作为母体,设计合成了一系列四苯基乙烯基具有聚集诱导发光效应的新型化合物,所有产物均用红外光谱分析、紫外光谱分析、核磁分析表征确认。研究新型化合物的聚集诱导发光特性,以及对金属离子和DNA分子的响应性。探究其是否可作为检测金属离子和DNA分子的探针,并研究新化合物在细胞成像、细胞染色的应用和细胞毒性。实验结果表明,制备得到的一系列四苯基乙烯基化合物均具有良好的聚集诱导发光性,其中DATPE和TATPE具有良好的水溶性。DATPE在浓度为5×104mol/L时可用作检测一定浓度范围内Cu2+的荧光探针;TATPE在浓度为5×10-4mol/L时可用作检测一定浓度范围内Ag+的荧光探针。在浓度为10-5Mol/L的DATPE溶液中,当ctDNA的浓度从0增加到70μM/mL,发光强度增加了近11倍。经过对鸡胚胎成纤维细胞,胰腺干细胞,肝癌细胞的染色实验证明,当DATPE浓度为0.5mg/mL时,细胞着色良好,可以做细胞成像的荧光染料,对生物体细胞基本无毒害作用。流式细胞仪(flow cytometer, FCM)是采用流式细胞术做为主要研究手段的一种分选标记各种粒子新型实验检测工具。流式细胞仪可以简单并方便快捷的对单个粒子或若干个粒子的中化学组成的类别与数量作出区分与鉴定,与此同时还能对含有特殊化学组分的粒子进行筛选与分离。也正因如此,流式细胞仪是现代科学研究中最先进的仪器之一。本课题组在原有流式细胞仪基础上改进,改进原来的细胞仪液流系统,增加一组分选细胞通道;并改进光学系统,引入分光器件,提升了激光在流式细胞仪中的利用效率。这些改进使得流式细胞仪的分离时间更短,分离纯度更高,分离效率得到有效提升。
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