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目的:青年女性长期处于低雌激素和高卵泡刺激素的激素紊乱状态称为卵巢早衰(prematureovarianfailure,POF),主要导致器官萎缩和持续性闭经的综合征。雌孕激素替代疗法建立人工周期,能够很快的改善低雌激素症状和内分泌环境,是目前临床上治疗卵巢早衰的主要方法,但是一旦停药后立刻出现之前的临床症状,雌激素服用时间过长会产生乳腺癌和子宫内膜癌的后遗症,运用激素替代疗法存在着非常高的风险。因此探索一种能负向调控卵巢早衰又对机体有正向调控作用的的药物成为卵巢早衰靶向药物研究的新思路。具有广泛药理作用的人参,在抵抗衰老方面有独特的应用价值。作为人参块根茎内的一种四环三萜类皂苷之一的人参皂苷Rg1能够产生有效的抵抗衰老、抑制氧化损伤,提高机体免疫能力的作用,同时也是一种有效性高,危险性小,无毒副作用的药物。研究显示,人参皂苷Rg1抵抗卵巢衰老,主要是通过抑制P16基因的表达,提高卵母细胞周围整齐排列的颗粒细胞的存活能力,减少卵泡的退化,从而有效促进各级卵泡的形成,发挥增强卵巢功能的作用。本研究将人参皂苷Rg1作用于D半乳糖诱导的BALB/c小鼠POF模型,通过人参皂苷Rg1调控PI3K/Akt/mTOR自噬通路来探讨人参皂苷Rg1对POF的作用,为临床POF的诊疗提供新的靶点,为POF靶向调控药物研究提供新思路。方法:把周龄在6～8周,体重为(21.6?1.7)g的雌性BALB/c小鼠54只随机分为三组,18只/每组,分别取名为PBS组,D-gal组以及Rg1组。D-gal组运用200mg/kg/d剂量的D-半乳糖进行颈背部皮下注射,不间断给药42d;PBS组给予颈背部注射等时等量磷酸盐缓冲液(PBS),连续注射42d;Rg1组在D-gal组处理基础上,于第15天开始给予腹腔注射Rg120mg/kg/d,不间断给药28d,同时D-gal组和PBS组也在第15天开始给予腹腔注射等时等量PBS,不间断给药28d。进行阴道脱落细胞涂片记录动情周期,检测人参皂苷Rg1对小鼠动情周期的影响;进行小鼠体质量记录及卵巢重量记录,检测人参皂苷Rg1对小鼠体重及卵巢重量系数的影响;运用ELISA试剂盒测定小鼠血清中卵泡刺激素、雌激素、超氧化物歧化酶、黄体生成素和过氧化氢酶的含量,检测人参皂苷Rg1对小鼠血清激素及抗氧化指标的影响;卵巢HE染色和SA-β-Gal染色检测卵巢衰老形态学改变;Westernblot检测自噬调控分子LC3-II、PI3K、p-Akt、p-mTOR、p-S6k、TSC2的表达和衰老调控因子SIRT1、P16~(INK4a)的表达,运用qPCR扩增技术检测SIRT1、P16~(INK4a)、PI3K、Akt、TSC2、mTOR、S6k的表达。结果:小鼠体质量结果显示,与PBS组比较,D-gal组小鼠体重增长率明显减缓,Rg1组体重增长率高于D-gal组;卵巢重量系数结果显示,与PBS组比较,D-gal组卵巢质量系数下降,Rg1组卵巢质量系数高于D-gal组;ELISA实验结果显示,与PBS组比较,D-gal组E_2,SOD,LH,CAT显著下调,FSH显著上调,Rg1组SOD,E_2,LH,CAT均高于D-gal组,FSH低于D-gal组;SA-β-Gal染色实验结果显示,与PBS组比较,D-gal组SA-β-Gal染色阳性率升高,Rg1组SA-β-Gal染色阳性率低于D-gal组;卵巢HE染色检测显示PBS组卵泡形态结构正常;与PBS组比较,D-gal组除闭锁卵泡外,其它各级卵泡数量减少;与D-gal组比较,Rg1组闭锁卵泡数量降低,原始、初级、次级卵泡数量增多。Westernblotting结果显示,与PBS组比较,D-gal组P16~(INK4a),PI3K,p-Akt,p-mTOR,p-S6k蛋白表达增高,LC3-II、SIRT1、TSC2蛋白表达降低;Rg1组P16~(INK4a),PI3K,p-Akt,p-mTOR,p-S6k蛋白表达低于D-gal组,LC3-II、SIRT1、TSC2蛋白表达高于D-gal组;qPCR结果显示,与PBS组比较,D-gal组P16~(INK4a),PI3K,Akt,mTOR,S6kmRNA水平明显增高,SIRT1、TSC2mRNA水平明显降低;Rg1组P16~(INK4a),PI3K,Akt,mTOR,S6kmRNA表达低于D-gal组,SIRT1、TSC2mRNA表达高于D-gal组。结论:1.Rg1具有延缓由D-gal诱导的小鼠卵巢早衰模型中卵巢早衰的作用。2.Rg1可通过调控PI3K/Akt/mTOR自噬通路延缓由D-gal诱导的小鼠卵巢早衰模型的卵巢早衰。