银杏内生菌胞外多糖的抑菌性及其对CYP450的影响

来源 :大连工业大学 | 被引量 : 3次 | 上传用户:lizhihua511352981
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银杏为中国所特有的药食同源孑遗植物,其所含有的多糖、内酯以及黄酮等活性成分,具有抗氧化、抗肿瘤等功效。同时活性多糖还具有抑菌性,对细胞色素P450有影响作用,在医药和食品领域有较广泛的应用。但银杏资源会受到气候、地域以及生长特性等因素的限制,影响了其开发与利用。植物内生菌能够产生与宿主相同或相似的生理活性成分。本论文利用从健康银杏植株中筛选出产胞外多糖且胞外多糖的生物活性较强的内生菌球形赖氨酸芽孢杆菌Endo Gin Ya6,发酵制备胞外多糖,与天然银杏叶多糖GBLP进行抑菌性、抗氧化性和对CYP450影响的研究,并进行结构和性质的对比研究,旨在利用内生菌发酵生产出可以替代银杏源多糖的类银杏多糖。研究结果如下:1、对球形赖氨酸芽孢杆菌EndoGinYa6进行发酵制备胞外多糖,产率为10.26g/L,对其进一步纯化后得到组成单一的组分EPSYa6。将其与银杏叶多糖GBLP进行对比研究可知,两者均含有一定量的糖醛酸和硫酸根,光谱测定显示两者都具有多糖、羧酸盐和吡喃环的特征吸收峰,均是酸性多糖;EPSYa6及GBLP单糖组成和摩尔比分别为:Man:Rah:Glc:Gal:Xyl:Ara:Fuc = 3.15:1.99:39.51:4.04:2.86:1.40:1;Man:Rah:Glc:Gal:Xyl:Ara:Fuc = 0.46:1.21:0.52:1.30:0.36:0.97:1;EPSYa6及 GBLP 的微观构象对比:分别呈现出蜂窝状不规则孔隙结构和不规则粒状堆积结构,由于同属于银杏类多糖,两种样品均包含有一定量的粒状物质。2、EPSYa6和GBLP对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌和八叠球菌均表现出一定的抑制作用。GBLP对革兰氏阴性菌大肠杆菌的抑菌性较强,EPSYa6对革兰氏阳性菌金黄色葡萄球菌和八叠球菌的抑制作用较强,而对于枯草芽孢杆菌,两种多糖的抑菌性均比较弱。EPSYa6对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌和八叠球菌的最低抑菌浓度分别为4mg/mL、8mg/mL、2mg/mL和4mg/mL。EPSYa6对扩展青霉有一定的抑制作用,而对链格孢霉没有明显的抑制作用。总的来说,EPSYa6对细菌的抑菌性比对真菌的抑菌性要强。3、EPSYa6和GBLP的体外抗氧化活性为:在实验设定浓度范围内,两者都有一定程度的还原能力和清除自由基的能力,其能力强弱和多糖浓度呈正相关;其中两种多糖对DPPH自由基的清除作用较强,在一定范围内呈现出量效关系。4、EPSYa6和 GBLP对CYP450的影响结果为:EPSYa6可以显著提高肝脏中NADPH-细胞色素C还原酶的活性,抑制CYP2C9的酶活性;可以显著增强血清中CYP3A4、CYP2E1和CYP2C19酶活性,抑制CYP2C9酶活性。对肝脏和血清中其他几种酶活性以及CYP450和Cyt b5含量没有显著影响。GBLP可以显著提高肝脏中CYP450含量,增强CYP1A2酶活性;同时可以显著抑制血清中CYP3A酶活性。对肝脏和血清中其他几种酶活性以及Cytb5含量没有显著影响。通过对EPSYa6和GBLP结构组成和生物活性方面存在的相同点和不同点的研究,为未来银杏内生菌多糖代替银杏叶多糖进行产品开发和研究提供了理论依据,解决了银杏叶多糖资源分布不均的问题,为银杏多糖在工业化生产和实践中的广泛应用提供了新的方向。
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