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目的本实验利用多孔羧基化聚苯乙烯微球,包埋上转换纳米粒子（upconversion nanoparticles,UCNPs）NaYF4:Yb,Er和磁纳米粒子（magnetic nanoparticles,MNPs）Fe2O3制备磁性上转换荧光编码微球,利用其优异的上转换荧光特性以及磁性粒子对微生物的富集、分离作用,通过双抗体夹心法在牙周炎患者龈下菌斑样本中富集并识别单纯疱疹病毒。为上转换纳米材料在椅旁快速检验牙周致病病毒,及进一步实现多种牙周致病因子的同时检测提供研究基础。方法实验使用分散聚合法制备聚苯乙烯种子微球,利用种子聚合法制备多孔羧基化聚苯乙烯微球,再采用高温溶胀法将NaYF4:Yb,Er上转换纳米粒子和Fe2O3磁纳米粒子包埋至多孔聚苯乙烯微球中,获得荧光强度和磁响应性能具佳的磁性上转换荧光编码微球,并在扫描电镜（SEM）下对微球的形貌进行表征。活化后的微球通过双抗体夹心法检验单纯疱疹病毒1型（Herpes simplex virus 1,HSV-1）标准液中的病毒,并以无菌去离子水为阴性对照,荧光显微镜下观测检验结果,TEM下观察微球与病毒的特异性结合。无菌纸尖取牙周炎患者龈下菌斑样本,样本预处理后使用微球检测使用荧光显微镜观测检验结果,并应用巢式PCR（nested Polymerase chain reaction,nested PCR）法检测同一样本作为对照。结果实验制得的聚苯乙烯微球大小均一,粒径小于0.5μm,高温溶胀法将磁粒子和上转换粒子包入其中后制得磁性上转换纳米粒子,纳米粒子无聚合现象。所制得的磁性上转换微球同时具有磁性和上转换荧光粒子特性。磁性上转换微球结合HSV-1的单克隆抗体后具有特异性,能特异性结合HSV-1后与罗丹明标记的抗体反应荧光显微镜下观察融合呈橙色,TEM下可见微球与病毒的特异性结合。在龈下菌斑样本中微球法及巢式PCR法检测结果一致,证明了磁性上转换纳米微球可以从龈下菌斑中检测出HSV-1。结论1、本课题利用高温溶胀法将稀土上转换纳米粒子与磁性纳米粒子包埋入多孔的聚苯乙烯微球。微球在扫描电镜下表征可见其大小均一,粒径为0.5μm,兼具有良好的上转换效应及磁效应。2、活化后微球可与单克隆抗体结合,形成特异性微球,TEM下观测到微球与HSV-1标准液反应后可特异性结合HSV-1,亦可见标志性荧光表现,证明微球可特异性结合HSV-1。3、以巢式PCR法为对照,验证了经过简单的样本预处理,本实验构建的磁性上转换微球检测系统可于检测龈下菌斑中捕获并检测单纯疱疹病毒1型,为高通量检测多种牙周致病因子的液相芯片检测平台的建立打下了基础。