促卵泡激素受体FSHR在曼氏无针乌贼生殖发育中的调控机制初探

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曼氏无针乌贼(Sepiella japonica)是中国沿海地区重要的经济头足类。但是随着曼氏无针乌贼资源衰退严重以及人工繁育技术瓶颈的突破,规模化人工增殖和资源养护工作也在中国沿海陆续展开。鉴于FSHR可能参与曼氏无针乌贼的生殖调控过程,本文采用组织学技术对曼氏无针乌贼的部分组织进行了显微观察,阐述了它们的组织学结构。同时,对FSHR基因进行克隆,组织特异性表达分析和在不同脑组织功能区中mRNA特异性表达定位展开研究,初步推测FSHR在曼氏无针乌贼生殖中的潜在调控作用。通过HE染色了解曼氏无针乌贼脑、视叶、肝脏、肠、胰脏、胃、缠卵腺的组织学结构;利用RACE方法克隆了曼氏无针乌贼FSHR基因的部分序列。氨基酸比对结果显示,已克隆的部分FSHR序列与已知的双斑蛸(Octopus bimaculatus)FSHR的开放阅读框(ORF)序列相似度较高。曼氏无针乌贼FSHR基因进化树构建分析结果显示,曼氏无针乌贼FSHR的基因和真蛸(Octopus vulgaris)与双斑蛸亲缘关系很近;RT-PCR结果显示,FSHR基因在Ⅴ期雄性曼氏无针乌贼的视网膜、肌肉、胰脏、脑和视叶中的表达量较高,在Ⅴ期雌性曼氏无针乌贼的肝脏、肠、视网膜、心脏、肌肉、鳃、皮肤、胃、胰脏、脑、视叶、缠卵腺、副缠卵腺中都有表达,在卵巢中没有表达;qRT-PCR方法结果显示,FSHR基因在曼氏无针乌贼五个发育时期中,在肝脏中的表达量最高且与其他组织都有明显差异,其次在脑、视叶、胰脏和缠卵腺中都有高表达;原位杂交结果显示,FSHR在雌性Ⅴ期曼氏无针乌贼脑的垂直叶、前基叶、亚垂直叶、脑亚脚叶、后足叶、上额叶和下额叶都有不同强度的信号,在腹部视神经连接、前连叶和腕叶没有信号。在视叶中的内颗粒细胞层、外颗粒细胞层、中央髓质和边缘髓质都有明显的信号。初步推测FSHR在曼氏无针乌贼的生殖调控中具有潜在作用。
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