HPLC-ELSD测定三种药食同源中药材主要活性成分含量

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随着人们对保健、养生需求的日益增长,“药食同源”原材料在食品、药品、保健食品中的应用越来越广泛,这些“药食同源”原材料在药品、保健品尤其是食品生产行业的质量控制水平便成为一个重要的课题。本文分别建立了测定黄芪、桔梗、山药中主要活性成分相对经济、快速、准确的高效液相色谱-蒸发光散射检测法(High performance liquid chromatography-evaporative light scattering detection:HPLC-ELSD),为桔梗、黄芪、山药相关的药品、保健品、食品行业提供了原材料质量控制的方法参考。本文的具体工作内容和结论如下:(1)建立了HPLC-ELSD测定桔梗中桔梗皂苷D含量的方法并进行了方法验证。通过标准曲线采用外标法计算得到桔梗皂苷D的量,线性回归方程式是:Y=1.4309X+3.4918,r=0.9996,在0.95μg~9.5μg区间上,目标物进样质量对数值和对应的峰面积对数值表现出较好的拟合程度。本文建立的该测定方法检出限为0.08μg,定量限为0.24μg,标准物质平行测定六次峰面积的RSD平均值为0.66%,平行测定六次待测样品中目标物含量的RSD值为2.07%,24小时内每隔四小时测定同一待测样品溶液中目标物峰面积的RSD值为0.93%,桔梗样品中桔梗皂苷D含量测定结果为0.19%,三个浓度九次测定的平均加标回收率为100.19%,RSD值为2.10%。数据结果表明,本方法灵敏度、精密度、稳定性表现良好,结果准确可靠,能够满足方法学验证的要求。(2)建立了HPLC-ELSD测定黄芪中黄芪甲苷含量的方法并进行了方法验证。通过标准曲线采用外标法计算得到黄芪甲苷的量,线性回归方程式是:Y=1.3578X+3.6628,r=0.9995,在0.88μg~8.8μg区间上,目标物进样质量对数值和对应的峰面积对数值表现出较好的拟合程度。本文建立的该测定方法检出限为0.07μg,定量限为0.21μg,标准物质平行测定六次峰面积的RSD平均值为0.68%,平行测定六次待测样品中目标物含量的RSD值为2.00%,24小时内每隔四小时测定同一待测样品溶液中目标物峰面积的RSD值为0.97%,黄芪样品中黄芪甲苷含量测定结果为0.16%,三个浓度九次测定的平均加标回收率为99.92%,RSD值为2.14%。数据结果表明,本方法灵敏度、精密度、稳定性表现良好,结果准确可靠,能够满足方法学验证的要求。(3)建立了HPLC-ELSD测定山药中薯蓣皂苷含量的方法并进行了方法验证。通过标准曲线采用外标法计算得到薯蓣皂苷的量,线性回归方程式是:Y=1.3415X+3.8379,r=0.9997,在0.56μg~5.6μg区间上,目标物进样质量对数值和对应的峰面积对数值表现出较好的拟合程度。本文建立的该测定方法检出限为0.05μg,定量限为0.15μg,标准物质平行测定六次峰面积的RSD平均值为0.65%,平行测定六次待测样品中目标物含量的RSD值为1.69%,24小时内每隔四小时测定同一待测样品溶液中目标物峰面积的RSD值为0.98%,山药样品中薯蓣皂苷含量测定结果为0.0357%,三个浓度九次测定的平均加标回收率为99.62%,RSD值为1.67%。数据结果表明,本方法灵敏度、精密度、稳定性表现良好,结果准确可靠,能够满足方法学验证的要求。
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