黄瓜黑斑病拮抗菌株的筛选和培养条件优化

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利用特定的培养基进行大批量的分离和纯化,得到了八株木霉菌株,分别是T-1、T-2、T-3、T-4、T-5、T-6、T-7、T-8。菌株菌落开始时为白色,致密,圆形,向四周扩展,后从菌落中央产生绿色孢子,中央变成绿色。菌落周围有白色菌丝的生长带,最后整个菌落全部变成绿色。通过对这八株木霉菌株生长速度的测定,初筛挑选出了三株生长较快的菌株T-1、T-5和T-7。复筛通过与黄瓜黑斑病菌对峙实验来找出优秀的拮抗菌株。其中T-7菌株为最佳拮抗菌株,其拮抗的表现为木霉与黑斑接触时会覆盖于黑斑表面,进行寄生生长,使黑斑不能继续生长,甚至死亡。通过对筛选得到的木霉拮抗菌株T-7进行培养条件的优化,发现pH值、温度、营养对拮抗菌株的生长有显著作用,而光照条件,培养时间等因素并不显著。通过正交试验最优培养条件:pH 6,温度28.5℃,碳源乳糖,加量15g/L。为了提高拮抗菌株对黄瓜黑斑病的防治效果,采用诱变法来提高木霉拮抗菌株的拮抗能力。实验采用紫外照射对菌株T-7进行诱变处理,经过2次重复诱变筛选,最终得到对黄瓜黑斑病更为有效的拮抗作用菌株Ⅱ-8,在对峙实验中,此株菌株平均生长速度达到0.798mm/h,比先前菌株增长了0.061mm/h,对黄瓜整株和叶片防治效果分别达到88.89%和91.67%。诱变作用初见成效。
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