耐辐射奇球菌(Deinococcus radiodurans)以具有极强的DNA损伤修复能力而著称,是研究DNA损伤修复的理想模式生物。pprl是耐辐射球菌体内的一个重要的DNA修复开关基因,通过直接或间接的调控一系列通路来加强DNA修复能力。研究表明,pprl能够调控氧化应激、能量代谢、转录调控、信号转导、蛋白折叠和组装等途径相关基因的转录表达,使细胞生存。在此基础上,本文对PprI蛋白在中度嗜热菌(Deinococcus geothermalis)中的同源物DG0395进行了研究,实验结果如下所示：1.从中度嗜热菌中克隆dg0395基因,构建了表达质粒,转化到大肠杆菌表达菌株中。2.优化DG0395蛋白诱导表达的条件,并通过AKTA纯化系统纯化得到了该蛋白。3.体外活性实验发现DG0395具有与PprI相同的金属酶活性,底物同样为DdrO;最适酶切温度为55℃,而PprI的最适酶切温度45℃; PprI与DG0395酶切的最适合PH都为8.0；之前研究发现Mn2+能激活PprI的酶切活性,本实验发现DG0395的酶切活性同样能被Mn2+激活。4.在pprI缺失株YR1的基础上构建了pprI补偿株YR1-PprI和ddg0395补偿pprI功能株YR1-DG0395.与野生株R1相比,PprI缺失突变株YR1在电离辐射照射,紫外照射,过氧化氢处理下,生存率大大下降,而PprI补偿株YR1-PprI和DG0395补偿PprI功能株YR1-DG0395与野生型差别不大,说明DG0395在体内具有PprI相似作用,能补偿PprI的功能。5.分别测定了野生型菌株R1和PprI突变株YR1以及PprI补偿株YR1-PprI与DG0395补偿株YR1-DG0395的生长速度,并通过菌斑实验比较了四个菌株在不同温度下生长速度的差异。根据实验结果推测,PprI在耐辐射球菌体内行使与生长有关的功能,DG0395能补偿其功能,但DG0395补偿株YR1-DG0395更适合在45℃高温下生长。DG0395是PprI在中中度嗜热菌中的同源物,对其功能研究有助于了解PprI在体内的作用机制。本实验发现DG0395具有与PprI相同的蛋白酶活性,并能补偿PprI在体内的功能。推测Deinococcus属细菌中存在一条共同的由Pprl介导的DNA修复途径。