目的 ①建立大鼠颈动脉再狭窄模型,原位灌注固定取材。评价血管成形术(PTA)后血管重塑(VR)的动态变化规律,定量分析血管重塑在血管再狭窄过程中的变化及作用。②观察PTA后不同时间血管壁细胞增殖、凋亡变化特点及超微结构改变,分析细胞数量变化与血管各层面积的关系,探讨细胞增殖、凋亡指数变化与血管重塑和再狭窄的关系。③观察PTA后,bcl-2和bax基因在蛋白水平表达的动态变化特点,分析其与细胞凋亡的关系,探讨细胞凋亡调控基因在血管再狭窄过程中的作用及意义。 材料和方法 1、动物模型和分组SD雄性大鼠70只,分原位灌注实验组、对照组和非原位灌注对照组。实验侧颈总动脉用改良导丝法制作再狭窄模型,对侧颈总动脉为假手术对照组。每组10只大鼠,于制模后1h、3天、7天、14天、28天和42天原位灌注固定取材。根据HE染色、Masson染色标本情况,选血管形态正常、结构完整的42只动物标本,各时间点7只动物。非原位灌注固定对照组随机选取7只动物标本作对照进行后续染色及处理。 2、病理学检查 所有标本行HE染色,Masson三色染色法进行染色。对PCNA、α-Actin、bcl-2、bax采用免疫组织化学染色,细胞凋亡行进行原位杂交染色(TUNEL法)。选取1h、3、7、14天中标本各两块行电镜检测,观察细胞增殖、凋亡、细胞表型转化的超微结构变化。 3、病理学资料图像分析 采用病理图像分析系统对标本HE、Masson染色片进行形态计量分析。分别计数PCNA、bcl-2、bax免疫组化染色片和TUNEL