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背景:增生性玻璃体视网膜病变(Proliferative vitreoretinopathy,PVR)是多种细胞和细胞因子参与的一种眼内创伤修复反应,是视网膜脱离手术失败的主要原因。视网膜色素上皮细胞(Retinal pigment epithelial cell,RPE)的增生和移行在PVR的病理过程中起重要作用。肝细胞生长因子(Hepatocytegrowth factor,HGF)是具有多种生物活性的细胞因子,通过与受体结合转导其生物学效应,发挥其促细胞增生、促运动和促形态发生等作用。目前国内外对HGF的研究主要在肝肾脑疾病及肿瘤生物行为等领域,在眼科方面,特别是增生性视网膜疾病等方面国内未见报道。 目的:本实验包括三部分:(1)研究HGF对RPE的促增生和促移行作用。(2)定量研究HGF在PVR和增生性糖尿病视网膜病变(proliferative diabeticretinopathy,PDR)患者玻璃体的水平。(3)观察PVR不同时期视网膜前膜和培养的人RPE中肝细胞生长因子受体(HGFR)的表达情况。 方法:(1)通过四唑盐比色(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)实验观察HGF对培养的人RPE增生的影响;采用RPE损伤愈合模型,观察HGF对RPE移行的作用。(2)采用双夹心酶联免疫吸附测定法检测正常对照组、PVR组和PDR组患者玻璃体内HGF的含量。(3)采用免疫组化的方法检测HGF受体在玻璃体手术剥离的PVR视网膜前膜和培养的人RPE的表达情况。 结果(1)HGF浓度处于10μg·L-1~100μg·L-1时对RPE具有促增生作用(P<0.05或P<0.01),增生率为18.2%~34.8%,其中浓度为50μg·L-1作用3d达到最大促增生效果(P<0.01),增生率为32.8%;HGF可明显促进RPE移行,促移行能力分别为9.3%(2μg·L-1)、113.6%(10μg·L-1)、91.7%(50μg·L-1)、50.3%(100μg·L-1),其中HGF浓度为10μg·L-1时达到最大促移行作用(2)玻璃体内HGF的含量:正常对照组1.82μg·L-1~7.38μg·L-1(均值为3.34μg·L-1);PVR—A,B组3.79μg·L-1~12.81μg·L-1(均值7.41μg·L-1);PVR—C组7.66μg·L-1~20.14μg·L-1(均值11.99μg·L-1);PVR-D组10.34μg·L-1~24.56μg·L-1(均值15.55μg·L-1);PDR组10.54μg·L-1~33.36μg·L-1(均值17.20μg·L-1)。 @gB夭学项士q佰论支 PVR各组及PDR组玻璃体中HGF的含量比正常对照组显著升高(HO.01); PVR-C,D组和 PDR组玻璃体中 HGF的含量较 PVR-A,B组的含量升高(HO.05 or HO.of);PVR-D组和叩R组玻璃体中*F的含量与WR-C组比较含量也升高 (AO.05),玻璃体中 HGF的含量随着 PVR的发展而增高。PDR组玻璃体 HGF的 平均浓度高于总的wR组平均浓度,两组比较有差异性(AO.05)。(3)HGF受 体在6例PVR{级膜标本中,5例HGFR阳性表达,阳性表达率为83.3%;9例 PVRD级增殖膜标本中,有7例HGFR阳性表达,阳性表达率为77.8%。C级和D 级的增殖膜HGFR阳性表达率无显著性差别(尸=0.693)。HGF受体在培养的RPE 胞浆中呈阳性表达。 结论:()HGF可促进 RPE增生和移行,是 RPE的有丝分裂原和强力的促移 行因于。(2)HGF在叫R和mR的玻璃体中含量升高。(3)HGF受体在叫R视网 膜前增殖膜和人色素上皮细胞中表达,提示HGF可能参与了PVR增殖膜的形成。 以上结果提示HGF有可能参与了PVR的形成和发展,并在PVR的病理过程中起 作用。