目的:探讨单核细胞株THP-1细胞表面膜联蛋白A2（ANXA2）在抗磷脂综合征（APS）患者IgG/β₂糖蛋白I（β₂GPI）复合物诱导细胞组织因子（TF）表达中的作用。方法:①构建插入人ANXA2 cDNA序列的真核表达质粒pIRES₂-eGFP-ANXA2,酶切及测序鉴定,脂质体介导法转染293T细胞,获得ANXA2过表达细胞。②软件分析并设计合成四条ANXA2特异性shRNA序列,与慢病毒载体pGCSIL-GFP连接,PCR及测序鉴定正确后,与过表达质粒共转染293T细胞,筛选出有效干扰序列并包装293T细胞获得重组慢病毒LV-RNAi-ANXA2,感染单核细胞株THP-1,验证内源干扰效率,建立ANXA2 RNAi细胞模型。③利用纯化的APS患者IgG与β₂GPI复合物刺激单核细胞株THP-1、ANXA2表达沉默的THP-1细胞及过表达ANXA2的293T细胞一定时间,观察不同细胞TF mRNA水平及TF活性变化,分析ANXA2在此过程中的作用。④将THP-1细胞膜裂解物与β₂GPI、抗β₂GPI抗体共沉淀,Western blotting检测共沉淀标本中ANXA2的存在,观察天然状态下的ANXA2能否与β₂GPI结合。结果:①构建的质粒pIRES₂-eGFP-ANXA2酶切及测序均正确,转染293T细胞后,ANXA2 mRNA和蛋白表达明显增高。②成功构建人ANXA2 siRNA慢病毒表达质粒并筛选出有效干扰片段;将其包装293T细胞后收获的干扰慢病毒滴度为3×10⁹ TU/ml;干扰病毒感染THP-1细胞后ANXA2的mRNA和蛋白表达均被沉默,其感染THP-1细胞的最佳MOI值为100。③APS IgG与β₂GPI复合物能够增强THP-1细胞TF mRNA及活性的表达,而对ANXA2表达沉默后的THP-1细胞TF表达没有促进作用;另外,此复合物对转染了pIRES₂-eGFP-ANXA2的293T细胞TF表达具有增强效应,证明ANXA2在此过程中起重要作用。④THP-1细胞膜裂解物与β₂GPI、抗β₂GPI抗体的共沉淀标本,经Western blotting检测证明有ANXA2的存在,说明细胞表面ANXA2能够与β₂GPI/抗β₂GPI复合物结合。结论:ANXA2作为APS IgG/β₂GPI复合物在THP-1细胞表面的受体,介导后者刺激细胞表达TF,在抗磷脂综合征（APS）高凝状态的形成中发挥重要作用。