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目的探讨14-3-3β在骨肉瘤细胞中的表达变化,并探讨14-3-3β对骨肉瘤细胞生物学行为的影响及其可能机制,以便为骨肉瘤的预后以及靶向治疗等提供科学依据。方法培养骨肉瘤细胞系(MG63、SaOS-2和U2OS)和正常人成骨细胞系(hFOB1.19),采用Trizol试剂和RIPA裂解液分别提取细胞的总RNA和总蛋白,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和western blotting技术分别分析14-3-3βmRNA和14-3-3β蛋白在骨肉瘤细胞(三个骨肉瘤细胞系:MG63、SaOS-2和U2OS)和人正常成骨细胞中的表达变化,并分析它们与骨肉瘤的相关性,并进一步探讨14-3-3β对骨肉瘤细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响,选择骨肉瘤细胞MG63为研究对象,转染14-3-3βsiRNA和无关序列分别作为实验组和对照组,不经任何处理的MG63作为空白组,通过CCK-8法检测14-3-3β对骨肉瘤细胞活力的影响,通过流式细胞仪技术分析14-3-3β对骨肉瘤细胞增殖能力的影响,通过Transwell侵袭小室分析14-3-3β对骨肉瘤细胞侵袭和迁移能力的影响。通过western blotting技术检测14-3-3β对β-catenin、Cyclin D1、c-myc和MMP-9表达的影响。结果1,与匹配的瘤旁正常组织相比,14-3-3βmRNA以及蛋白在骨肉瘤组织中高表达(P<0.05)。2,与人正常成骨细胞(hFOB1.19)相比,14-3-3βmRNA以及蛋白在骨肉瘤细胞系(MG63、SaOS-2和U2OS)中高表达(P<0.05)。3,与阴性对照组以及空白组的MG63细胞相比,14-3-3βmRNA以及蛋白在沉默组的MG63细胞中显著低表达(P<0.05)。4、CCK-8结果显示:与阴性对照组以及空白组的MG63细胞相比,沉默组MG63细胞的活力显著降低(P<0.05)。5、FCM结果显示:与阴性对照组以及空白组的MG63细胞相比,沉默组MG63细胞的增殖指数显著降低(P<0.05)。6、Transwell侵袭小室分析结果显示:与阴性对照组以及空白组的MG63细胞相比,沉默组MG63细胞的侵袭和迁移能力显著降低(P<0.05)。7、Western blotting结果显示:与阴性对照组以及空白组的MG63细胞相比,β-catenin、cyclin D1、c-myc、和MMP-9在沉默组MG63细胞中的表达水平显著降低(P<0.05)。结论1.14-3-3β在骨肉瘤中高表达。2.沉默14-3-3β可以抑制骨肉瘤细胞的增殖和迁移。3.沉默14-3-3β蛋白可能是通过Wnt/β-catenin通路发挥其抑癌作用。