【摘 要】
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目的:构建超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)基因tem-105克隆和氨基糖苷-3-N-乙酰基转移酶基因aac(3)-Ⅱ克隆及融合基因tem-/aac(3)-Ⅱ克隆,为进一步研究它们在工程菌中表达及其表达
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目的:构建超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)基因tem-105克隆和氨基糖苷-3-N-乙酰基转移酶基因aac(3)-Ⅱ克隆及融合基因tem-/aac(3)-Ⅱ克隆,为进一步研究它们在工程菌中表达及其表达产物的生物学活性奠定基础.方法:通过美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)推荐的ESBLs确证试验筛选产ESBLs的大肠埃希菌(E.coli)和标准纸片扩散法(K-B法)筛选对氨基糖苷类抗生素耐药的大肠埃希菌.耐药菌株提取总DNA,利用Primer Premier5.0设计的特异性引物,PCR检测β-内酰胺酶基因.PCR检测aac(3)-Ⅱ基因保守区及产物直接测序,初步分析该地区aac(3)-Ⅱ保守区基因型与氨基糖苷类抗生素耐药之间的关系.结论:(1)成功克隆tem-105基因,aac(3)-Ⅱ基因及融合基因tem-105/aac(3)-Ⅱ,为进一步研究奠定了基础.(2)SOE是十分有效、快速、可靠的体外基因重组的方法.
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