甾体激素药物的母核在其C_1,2位引入双键后,能成倍地提高其药理活性。与化学方法相比,采用微生物法脱氢,具有反应条件温和、专一性强以及转化率高等优点,已成为甾体激素药物生产中的重要反应之一。去氢17α-甲基睾丸素（Dehydro-17α-methyltestosterone）,商品名美雄酮（Methandienone）是一种蛋白质同化激素,与17α-甲基睾丸素相比较,具有同化作用强,但雄性激素样作用弱的优点。论文就17α-甲基睾丸素生物脱氢的菌种选育、生物转化工艺技术以及产物美雄酮的分离纯化等方面进行了深入的研究。 选育了适用于17α-甲基睾丸素生物转化脱氢的微生物菌种。从实验室收集、保藏的3株简单节杆菌中,通过摇瓶转化试验,进行菌种的初筛,并经过菌种的分离、纯化,得到转化率较高的DK31-2-50菌株。 对DK31-2-50菌株转化17α-甲基睾丸素的工艺条件进行研究。通过单因素实验和正交试验优化,确定的较佳培养基组成为（g/L）:葡萄糖10,玉米浆12,酵母膏5,KH₂PO₄ 2.5。生物催化17α-甲基睾丸素C_1,2位脱氢的最适条件为:接种量5%,培养基初始pH 6.4,摇床转速在培养期采用160r/min、转化期采用220r/min,采用底物粉末直接投入法,并加入4%的DMSO分散转化结束后,发酵液中出现较大的产物结晶,最终转化率达70%以上。 在摇瓶试验的基础上进行7L发酵罐放大试验,确定了相关操作参数,为工业化生产提供有价值的方案。