【摘 要】
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人在感染狂犬病病毒（RABV）后,如果不加干预可引起致病性的脑炎,病死率接近100%。近年来这种病导致了全球数万人的死亡,其中一大部分是儿童,这对于公共健康问题是一个很大的挑战。甲型流感病毒（IAV）基因组由八个单链负义RNA片段（v RNA）组成,随着甲型流感病毒反向遗传操作系统的成熟,可以针对不同病原体构建基于IAV的重组候选疫苗。本文,我们拯救了两种具有复制能力的重组甲型流感病毒（r WSN
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人在感染狂犬病病毒（RABV）后,如果不加干预可引起致病性的脑炎,病死率接近100%。近年来这种病导致了全球数万人的死亡,其中一大部分是儿童,这对于公共健康问题是一个很大的挑战。甲型流感病毒（IAV）基因组由八个单链负义RNA片段（v RNA）组成,随着甲型流感病毒反向遗传操作系统的成熟,可以针对不同病原体构建基于IAV的重组候选疫苗。本文,我们拯救了两种具有复制能力的重组甲型流感病毒（r WSN-NA-PHD、r WSN-NS-PHD）,它们的基因组嵌入了狂犬病病毒糖蛋白的PHD结构域片段,其中一种嵌入在NA上,另一种嵌入在NS上。这两种重组甲型流感病毒在293T细胞中被成功拯救并且我们验证了它们具有遗传稳定性,PHD蛋白在受感染的哺乳动物细胞中有效表达。在体外扩增时,两种重组病毒相比野生型H1N1（A/WSN/33）有着降低的峰值滴度和减弱的空斑形成能力,并且在r WSN-NS-PHD上体现的更为明显。在BALB/c小鼠中,与野生型H1N1（A/WSN/33）病毒相比,两种重组甲型流感病毒的致病性减弱,并且两次剂量的免疫后能够诱导小鼠针对狂犬病病毒特异性的中和抗体的产生,r WSNNA-PHD的诱导效果相对r WSN-NS-PHD更好。最后,重组甲型流感病毒免疫诱导了Th1型细胞因子,这可能在抗感染免疫反应中对免疫调节起重要作用。
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