贡山三尖杉和三种铁线莲属药用植物的化学成分研究

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本论文对三尖杉科三尖杉属的贡山三尖杉(Cephalotaxus lanceolata K.M.Feng ex Cheng et L. K.Fu)植物枝叶的生物活性成分及其抑制肿瘤活性进行了较为系统和深入的研究;此外,还对毛莨科铁线莲属的三种植物即合柄铁线莲(Clematis connata DC.)、疏金毛铁线莲(C.chrysocoma var.glabrescens)和毛莨铁线莲(C. ranunculoides Franch)藤茎的化学成分进行了初步的研究。利用正相、反相和凝胶色谱技术以及核磁共振、高分辩质谱等多种分析方法,从贡山三尖杉和合柄铁线莲分离得到了11个化合物;通过气相色谱质谱分析技术从三种铁线莲中分析鉴定了115个挥发性化合物。这些化合物的结构类型和种类涉及生物碱、内酯、黄酮及甙、甾体、脂肪酸、稠环芳香烃、卤代烷烃和其它酚性成分。   首先,从贡山三尖杉干燥枝叶中分离鉴定了10个生物活性成分,它们是:檞皮素-3-O-αt-L-鼠李糖苷(1)、6″-乙酰基-檞皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷(2)、11-羟基粗榧碱(3)、桥氧三尖杉碱(4)、海南粗榧内酯(5)、海南粗榧内酯醇(6)、(+)-儿茶素(7)、(-)-表儿茶素(8)、β-胡萝卜甙(9)、β-谷甾醇(10)。这10个化合物都是首次从该植物中分离得到。采用MTT法对贡山三尖杉中分离得到的4个化合物进行了七种肿瘤细胞株的生长抑制活性测试。结果表明:桥氧三尖杉碱对白血病细胞Jurkat、K562、U937,对实体肿瘤细胞肝癌HepG2、胃癌SGC7901均有明显的抑制活性。海南粗榧内酯醇对白血病细胞HL-60、Jurkat、K562、U937,对实体肿瘤细胞肝癌HepG2、胃癌SGC7901均有明显的抑制活性。其结果表明,海南粗榧内酯醇对六种肿瘤细胞株的IC50值与阳性对照物顺铂相当,桥氧三尖杉碱对四种肿瘤细胞株的IC50值与顺铂相当,即这两种生物活性成分对多种肿瘤细胞株有显著的抑制作用,具有良好的抗癌药物的开发利用价值。   其次,对三种铁线莲属药用植物合柄铁线莲(C.connata DC.)、疏金毛铁线莲(C. chrysocoma var.glabrescens)和毛莨铁线莲(C. ranunculoides Franch)地上部分的石油醚萃取物进行了GC-MS分析,共鉴定了115个挥发性成分。三种铁线莲属植物挥发性化学成分比较分析表明:它们以C20-C28的长链烃类化合物为主,其成分和含量的差异较大。合柄铁线莲中相对含量高的是二十碳烷(5.51%),疏金毛铁线莲中相对含量高是二十碳烷(8.45%)和二十八碳烷(7.16%),毛茛铁线莲中相对含量高的是二十八碳烷(30.73%)。在三种铁线莲中,角鲨烯和油酸、亚油酸、亚麻酸等功能性脂肪酸的分布与含量有明显差别。因此这类成分可作为该属植物脂溶性部份功能评价的理论依据之一。首次在疏金毛铁线莲和毛莨铁线莲中发现角鲨烯,其含量在含角鲨烯的植物来源中比较高,推测疏金毛铁线莲和毛茛铁线莲可能具有多方面的活性和用途。此外三种植物中都存在小于0.4%以下的稠环芳香类化合物,这些成分的存在可能与该属植物的药材有小毒相关。对该属的八种植物的GC-MS分析结果进行比较,这些植物的化学成分种类和含量的差别都比较大。因此GC-MS分析可作为铁线莲属植物种间的鉴定和道地药材的质量和安全性评价的辅助手段。另外,利用柱层析分离技术从合柄铁线莲全草中还分离得到了三个已知化合物,即5,7,4-三羟基-黄酮-3-O-β-D-葡萄糖甙(11),β-胡萝卜甙(9)和β-谷甾醇(10)。   最后,对三尖杉属植物的有效成分的研究概况(1969-2009)进行了综述,并对三尖杉属的天然产物的药理活性和化学分类进行了讨论。
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