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山墙藓(Tortula ruralis)是一种具有重要生态应用价值的极度耐旱藓类,所发挥的生态功能不容忽视。本试验以山墙藓新生茎尖作为外植体,采用组织培养方法,成功构建其配子体再生体系。在此过程中,研究了培养基类型、温度、光照、pH值、琼脂含量、蔗糖含量、激素种类和浓度等对山墙藓生长的影响,并进行了扩大繁殖培养,得出如下结果:1.利用山墙藓新生幼嫩茎尖作为外植体进行组织培养,90 d的时间可获得再生配子体植株。野外采集的材料带菌较多,而将材料进行预培养获得的新生部分带菌较少且生活力强,用来消毒取得良好效果,最适消毒方法为3%的NaCl O消毒5 min,无菌水冲洗,0.05%HgCl2再次消毒20 s,无菌水冲洗6~7遍。2.Beneck培养基适合山墙藓的消毒培养以及原丝体的扩展生长和配子体的营养生长,MS培养基不适合消毒培养;将消毒成功返绿生长的材料转接至MS、1/2 MS、1/10MS培养基上,均未见原丝体生长而直接分化为小配子体,配子体长势弱;而接至Knops培养基上的材料枯黄死亡。3.山墙藓适合生长于中性偏酸的培养基上;山墙藓的生长速度与琼脂含量呈负相关性;温度为20℃、光照强度为4 000 lx、光照时间12 h/d时,山墙藓长势最好;蔗糖对于原丝体的形成时间和扩展生长具有积极促进作用,随着浓度增加作用愈明显,但高浓度蔗糖抑制芽体分化。4.IAA、IBA明显促进山墙藓茎部伸长生长;2,4-D也明显促进山墙藓生长,但同时加速植物体衰老;6-BA促使茎尖端细胞膨大成球状;KT能够诱导出黑色松散、疏软的愈伤组织,转至Beneck培养基后成功分化出配子体。5.将已分化的植物体的假根、茎段、叶片分别转接至Beneck培养基,假根的增殖量最大,叶片次之,茎段增量最小,与设置的完整植株对照相比,分离植株的生物量增加远超对照植株的增量,90 d生物量增加可达到20倍;将无菌配子体进行研磨后接至无菌培养基,原丝体生长旺盛,部分分化出配子体。