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灰霉病是一种世界性植物真菌病害。该病原菌的寄主范围很广,几乎可以侵染所有种类的植物,感染受害植物的各个部位。由于病原菌具有寄主范围广,侵染力强,易变异,易产生抗药性等特点,使得病害能反复发生,难以防治。目前我国针对灰霉病主要采用化学防治的方法。但由于化学农药潜在着对人类健康的危害、对环境的污染、对非靶标生物的影响及植物病原菌抗性的产生等问题,使得研制开发和应用高效、低毒、低残留、无公害、与环境兼容性良好的生物农药成为未来农药发展的必然趋势。现代生物农药领域中,微生物以资源丰富、繁殖迅速、培养方便、次生代谢产物多样性显著和遗传背景相对简单等优点,逐渐成为研究与开发的热点。
本文从抗百合灰霉病活性放线菌筛选基础工作做起,以病原菌为靶标进行生物活性筛选:孢子萌发抑制实验和抑菌圈实验。从土壤中分离的150株放线菌中筛选出30株具有活性的菌株。此外,还结合了TLC筛选的方法初步判断这些菌株代谢产物的产生情况并排除重复,最终确定活性好且稳定的菌株AGR-0001作为研究对象,该菌株的抑菌活性较阳性对照500μg/ml的扑海因强。
通过培养基的初步选择和发酵方式的选择,采用1#培养基进行5L液态发酵先确定活性成分;然后用发酵罐放大发酵,通过对发酵产物的提取,分离和纯化,最终得到了对百合灰霉病具有很强抑制活性的化合物。
通过核磁共振谱的解析,得到了该化合物结构片段信息。