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本研究以双叶松松针为原料,采用水提法、乙醇浸提法进行粗提取,并对松针鲜叶和落叶的抑菌效果相比较,筛选出抑菌效果最佳者,即松针鲜叶进行后续试验。首先进行单因素试验,松针抗菌物质最优提取条件的确定是采用响应面优化试验。然后粗提物则利用葡聚糖凝胶层析法进行分离,确定其蛋白浓度。根据Tricine-SDS-PAGE电泳试验,得到相对分子质量。最后对于松针抗菌物的耐热性、耐酸碱性、抗离子作用、抗紫外辐照作用进行研究,确定松针抗菌物的最小抑菌浓度。试验结果显示:1、乙醇浸提法是松针抗菌物提取效果最好的方法。单因素试验时,为了确定每个因素的三个最佳水平,用抑菌圈直径的大小作衡量。响应面试验定为三因素三水平后,就得到了松针抗菌物的最佳提取条件,即料液比为1:20,乙醇浓度为75%,提取时间为5h。2、松针抗菌物的分离葡聚糖凝胶SephadexG-25层析分离,得到较纯的物质。蛋白质浓度为0.87mg/mL。3、松针抗菌物的鉴定Tricine-SDS-PAGE电泳试验,结果表明:电泳图上出现一条单带,证明其已达到电泳纯。相对分子质量为2.583KD.4、松针抗菌物的生物学活性(1)热稳定性是松针抗菌物的生物学活性之一。在60℃-100℃热水浴中30 min后,抑菌活性差异不显著。但在121℃热水浴30min抑菌活性消失。(2)松针抗菌物具有耐酸碱性。放置于酸性(pH<6.0)和碱性(pH>8.0)的环境中,抑菌活性基本不变。(3)抗离子作用也是松针抗菌物生物学活性。当松针抗菌物显示出抑菌活性,是在盐离子浓度小于5%时,而当松针抗菌物的盐离子浓度达到7%-9%时,抑菌活性基本消失。(4)松针抗菌物同时也有抵抗紫外辐射的作用。在紫外照射下5h以后,抑菌活性基本不变,抑菌活性会减弱后消失,是当照射时间在6h以上的时候发生的。(5)松针抗菌物会对一部分菌类的生长表现出抑制作用,包括:大肠杆菌(Escherichia coli)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、肠炎沙门氏菌(Salmonella enteritidis)、啤酒酵母(Saccharomyces cerevisiae Hansen)。但对青霉菌(Penicillium notatum)及黑曲霉(Aspergillus niger)这一类真菌则没显示出抑菌效果。(6)分离出的松针抗菌物对大肠杆菌的最小抑菌浓度为0.386 mg/mL、金黄色葡萄球菌的为0.571mg/mL,对肠炎沙门氏菌、啤酒酵母的则约为0.164mg/mL。对青霉菌和黑曲霉无抑菌作用。