基于“经络脏腑”理论探讨艾灸治疗膝骨关节炎的疗效及对关节软骨和肠道菌群的影响

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第一部分艾灸治疗膝骨关节炎的临床疗效和安全性目的:评价艾灸对KOA患者的临床疗效和安全性。方法:将90名KOA患者,按1:1:1的比例随机分针刺组、电针组和艾灸组,于治疗前、治疗4周后观察三组患者NRS评分、WOMAC评分、血清中IL-1β和TNF-α的浓度,治疗4周后进行疗效评定。结果:1.治疗后,针刺组、电针组和艾灸组有效率分别是39.29%、60.71%和78.57%,艾灸疗效最佳。2.治疗后,各组NRS评分、WOMAC各项评分均降低;其下降幅度,艾灸组大于电针组,电针组大于针刺组。3.治疗后,各组患者IL-1β和TNF-α浓度均降低;其下降幅度,艾灸组大于电针组,电针组大于针刺组。小结:艾灸具有改善疼痛、僵硬和关节功能作用,有效率达78.57%,可能与降低患者血清TNF-α和IL-β含量有关。第二部分艾灸对膝骨关节炎大鼠关节软骨的影响目的:观察艾灸对碘乙酸钠诱导的KOA大鼠软骨损伤的保护作用,探究经络“外络于肢节”的科学道理。方法:将36只大鼠随机分为正常组、模型组、艾灸组和双氯芬酸钠组,将正常组以外的大鼠采用碘乙酸钠诱导法复制KOA模型。模型组不干预,艾灸组采用艾灸治疗,双氯芬酸钠组口服双氯芬钠治疗。治疗4周后,大体观察大鼠软骨形态学变化;采用HE染色和番红染色观察大鼠软骨病理学变化,并进行Mankin’s评分;采用Western Blot法检测软骨组织IL-1β和TNF-α的表达水平;采用ELISA法检测血清IL-1β和TNF-α的浓度。结果:1.大体观察结果显示,模型组局部缺损最严重;艾灸组和双氯芬酸钠组损伤减轻。2.HE染色和番红染色显示,模型组软骨结构的破坏、细胞死亡和蛋白多糖大丢失较重,Mankin’s评分较高,而艾灸组和双氯芬酸钠组损伤较轻且Mankin’s评分降低,艾灸组与双氯芬酸钠组Mankin’s评分相当。3.ELISA结果显示,模型组血清中IL-1β和TNF-α的表达高于正常组;艾灸组和双氯芬酸钠组IL-1β和TNF-α的表达水平降低,Western Blot结果与ELISA结果一致。小结:艾灸对KOA大鼠软骨具有保护作用,可能与降低局部和系统炎症有关。第三部分艾灸对膝骨关节炎大鼠肠道菌群的影响目的:研究艾灸对碘乙酸钠诱导大鼠肠道菌群的影响,进一步探究经络“内属于脏腑”的科学内涵。方法:实验方法同上一部分,收集大鼠新鲜粪便,采用细菌16S r DNA法进行高通量测序并及生物学分析。结果:1.OTU分析中,正常组、模型组、艾灸组和双氯芬酸钠组的OTU数目分别为468、509、517和452。2.物种注释及分类学分析中,在门水平和属水平的分析,模型组有益菌乳酸菌降低,艾灸组有益菌增高,双氯芬酸钠组有益菌增高的同时有害菌也增加。3.α多样性和β多样性分析中,模型组和双氯芬酸钠组多样性下降,艾灸组多样性增加.艾灸组与正常组具有更近的相似性。4.组间样品LEf Se分析中,模型组的优势菌属是普雷沃菌属和考拉杆菌属,艾灸组的优势菌属是布劳特氏菌;双氯芬酸钠组的为肠球菌和志贺菌。5.Bug Base功能预测分析中,艾灸组提高了革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的比值,降低了细菌生物膜的形成及潜在致病性。小结:艾灸增加了KOA大鼠肠道菌群中多样性和有益菌丰度,降低致有害菌的丰度。结论:1.在临床研究中,艾灸组可有效改善患者疼痛、僵硬、关节功能等各方面,有效率达78.57%,为艾灸作用于经络发挥治疗作用提供了临床依据。2.艾灸对碘乙酸钠诱导KOA大鼠关节软骨具有保护作用,可能与抑制局部和系统性炎症有关,为经络“外络于肢节”,提供一定的实验参数。3.艾灸的治疗作用可能与调节肠道中肠道菌群的结构、多样性和功能有关,为经络“内属于脏腑”,提供一定的实验依据。综上所述:艾灸能有效缓解患者临床症状,并通过经络与体表肢节的联系作用于局部,发挥软骨保护作用;同时通过与脏腑的联系而作用于胃肠,以调解肠道菌群的稳态,丰富了“经络脏腑”理论,具有重要意义。
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