生长素(IAA)是最早发现的一类植物激素,在植物的生长、发育等过程中起着极其重要的作用,它参与一系列的环境和生长信号的传递,其中包括细胞的伸长和分裂,侧根的形成与分化、维管束的分化、植物的向地性和向光性及顶端优势等。生长素信号的传递起始于生长素与生长素受体的特异性结合。因此,生长素受体的研究直接关系到对生长素信号通路的探索。本文主要进行了水稻生长素结合蛋白(auxin-binding protein, ABP1)和生长素受体(transport inhibitor response, TIR1)的原核表达与纯化研究,获得了以下研究结果：1.以超级杂交稻株1S为材料,根据GeneBank中公布的ABP1及TIR1 cDNA序列设计引物,通过RT-PCR的方法克隆出生长素结合蛋白ABP1基因和生长素受体蛋白TIR1基因,测序后与GeneBank中相应序列比对无突变。2.将经过测序鉴定后的ABP1与TIR1基因分别克隆到原核表达载体pET-32a(+)中,构建了pET-32a-ABP1和pET-32a-TIR1原核表达载体,经PCR及双酶切鉴定后筛选出阳性克隆。3.将构建好的ABP1及TIR1原核表达载体,转化表达宿主菌BL21(DE3),加入诱导物IPTG进行诱导表达。通过对诱导温度、诱导时间、诱导物浓度等表达条件的优化,获得融合蛋白pET-32a-ABP1最适表达条件为37℃、0.8mmol/L诱导5h；而融合蛋白pET-32a-TIR1在不同的诱导浓度和诱导时间下均没有明显的差异。且通过表达形式的鉴定发现前者是以可溶的形式进行表达,后者是以不可溶的包涵体形式进行表达。4.利用pET32a上携带的His-tag与镍具有较强亲和力的特点,通过镍柱一步法纯化获得目的蛋白。针对两种蛋白的不同表达形式,ABP1蛋白采用天然条件下纯化的方式,而TIR1蛋白采用包涵体纯化的方式。本研究利用原核表达的方式获得了较高纯度的ABP1蛋白与TIR1蛋白,有利于生长素信号转导机制、蛋白质分子结构等后续研究的开展以及用于生长素(IAA)测定的生物传感器的开发奠定了基础。