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目的探讨CHFR（checkpoint with forkhead-associated and ring finger）基因启动子区DNA甲基化状态与胃癌组织及胃癌细胞系对化疗药物敏感度之间的相关性,为肿瘤耐药的评估寻找潜在的标志物。方法:1.通过甲基化特异性PCR（MSP）检测胃癌组织中CHFR启动子区的DNA甲基化状态,根据CHFR甲基化程度将胃癌组织分为高甲基化组（甲基化程度≥70%）与低甲基化组（甲基化程度<70%）;通过实时荧光定量PCR（real-time fluorescence quantitative PCR,RT-q PCR）检测胃癌组织中耐药基因ABCB1和MGMT的m RNA表达水平,并分析耐药基因的表达水平和CHFR甲基化状态的关系;2.MSP检测四个胃癌细胞系中CHFR启动子甲基化状态,RT-q PCR检测四个胃癌细胞系中ABCB1和MGMT的m RNA表达水平,分析细胞中CHFR启动子甲基化状态与ABCB1和MGMT表达的相关性;3.Incu Cyte S3活细胞动态成像与分析系统检测四个胃癌细胞系对奥沙利铂（L-OHP）、5-氟尿嘧啶（5-FU）的敏感性,并分析药物的敏感性与CHFR启动子甲基化状态的关系;4.选取对奥沙利铂最为敏感的MGC-803细胞使用浓度梯度递增法构建耐奥沙利铂细胞株,通过Incu Cyte S3系统检测耐药细胞株的耐药指数,计算耐药细胞株与亲本细胞的生长倍增时间,RT-q PCR检测耐药细胞株与亲本细胞中ABCB1和MGMT的m RNA表达水平,Western-blot检测耐药细胞株与亲本细胞中ABCB1和MGMT的蛋白表达水平,MSP检测耐药细胞株与亲本细胞中CHFR启动子的甲基化状态。结果:1.20例胃癌组织中CHFR启动子均发生一定程度的甲基化,其中高甲基化9例、低甲基化11例,CHFR启动子甲基化程度与患者性别、年龄、发生部位、分化程度、淋巴结转移与否无关联,CHFR高甲基化组中ABCB1的m RNA表达水平显著低于低甲基化组（0.0005±0.0006vs.0.0313±0.0020 P<0.01）,MGMT的m RNA表达水平也显著低于低甲基化组（0.0971±0.1346vs.0.1300±0.2439 P<0.05）;2.胃癌细胞系MGC-803、BGC-823、SGC-7901、MKN-74中CHFR的甲基化程度分别为74.8%、74.2%、72.0%和56.3%,ABCB1的表达水平分别为1.00、8.79±1.498、43.41±1.430、7453.32±12.345,MGMT的表达水平分别为1.00、1.03±0.012、19.25±1.347、430.44±8.567,ABCB1和MGMT的表达水平均与CHFR的甲基化程度呈显著负相关（r=-0.991,P=0.009;r=-0.995,P=0.005）;3.奥沙利铂对四个胃癌细胞系的IC50分别为4.601±0.11μɡ/ml、7.295±0.21μɡ/ml、7.373±0.32μɡ/ml、16.132±0.13μɡ/ml,5-氟尿嘧啶对四个胃癌细胞系的IC50分别3.343±0.15μɡ/ml、4.091±0.14μɡ/ml、8.721±0.16μɡ/ml、56.069±0.15μɡ/ml;四个胃癌细胞系对奥沙利铂和5-氟尿嘧啶的敏感性均与CHFR的甲基化程度显著正相关（r=0.981,P=0.019;r=0.999,P=0.001）;4.成功构建了耐奥沙利铂细胞株MGC-803/L-OHP（耐药指数4.568）,MGC-803/L-OHP细胞的倍增时间（32.52±1.26 h）是亲代MGC-803细胞（27.85±1.14 h）的1.17倍;MGC-803/L-OHP细胞中ABCB1和MGMT的m RNA表达水平显著高于MGC-803细胞（8.15±10.630和1.74±0.575倍,P<0.05）,蛋白表达水平也显著高于MGC-803细胞（6.59倍和1.57倍,P<0.05）;5.MGC-803/L-OHP中CHFR启动子的甲基化程度（64.97%±0.0011）较之MGC-803细胞（80.77%±0.0021）显著降低,（P<0.05）。结论:CHFR启动子的低甲基化状态与胃癌组织及细胞对化疗药物的耐药性密切相关,可作为胃癌耐药的指标。