【摘 要】
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该研究以抗稻瘟病的水稻品种的基因组DNA为模板,根据已知的NBS-LRR类抗病基因结构中氨基酸的保守区域,设计简并引物,通过PCR扩增获得了抗病基因同源序列的两个DNA片段,同时根
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该研究以抗稻瘟病的水稻品种的基因组DNA为模板,根据已知的NBS-LRR类抗病基因结构中氨基酸的保守区域,设计简并引物,通过PCR扩增获得了抗病基因同源序列的两个DNA片段,同时根据该品种携带的Pi-2(t)抗性基因的序列设计特异引物及水稻的遍在蛋白保守氨基酸序列设计任意简并引物,通过TAIL-PCR(thermalasymmetricinterlacedpolymerasechainreaction)扩增获得了Pi-2(t)基因的两个右翼序列DNA 片段.分别将它们与pGEM-TEasy Vector连接,转化E.coli DH5α,得到重组子,经酶切鉴定,结果获得了9个抗病基因同源片段的阳性克隆(分别命名为CR271、CR272、CR273、CR274、CR275、CR371、CR372、CR373和CR374)及两个右翼序列DNA片段的克隆(分别命名为JR2和JR3).
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