背景:新生抗原(neoantigen)简称“新抗原”。是指在正常组织中不表达,仅在肿瘤组织中存在,且能刺激免疫反应产生特异性T细胞的一类肿瘤特异性抗原。因为正常组织中不存在有新抗原,所以由新抗原产生的突变肽,刺激免疫系统形成的特异性T细胞不会对正常组织产生伤害。目前为止,新生抗原是基于T细胞的免疫治疗的最理想靶点。每个患者细胞内基因突变情况不同,产生的突变抗原有很大的差异性。至今为止已经报道的新抗原抗原肽疫苗都是根据患者自身定制的个性化疫苗。这限制了以新抗原为基础的癌症疫苗的大规模开发。在肺癌患者中有85%为非小细胞肺癌,且以腺癌居多。EGFR基因在非小细胞肺癌中的突变率达到60%以上。突变位点多集中于18-21外显子区域。在服用了酪氨酸激酶抑制剂(Tyrosine Kinase Inhibitor)药物后,对药物产生耐受的病人中,90%以上都是因为出现了19外显子上的T790M点突变。EGFR基因在肺癌患者中具有的高突变率和突变种类的集中性,针对EGFR突变基因产生的突变肽筛选的新抗原,可能会打破个体差异,使得肺癌疫苗的治疗具有普遍性。目的:筛选可以诱导特异性免疫细胞的EGFR突变短肽,为肺癌疫苗研发提供潜在的新抗原。方法:1.根据肺癌细胞EGFR基因在外显子18-21号的常见突变,计算机模拟合成相应突变短肽。每条短肽长度为10个氨基酸。2.用合成的短肽刺激肺癌患者外周血淋巴细胞进行体外培养,在培养过程中,观察细胞生长情况,检测细胞液中γ干扰素的变化,并通过流式细胞术检测特异性淋巴细胞生长情况。筛选出可以刺激淋巴细胞生长的突变短肽。3.将筛选出的短肽制成抗原乳剂,通过体内治疗荷瘤小鼠的方法。分析荷瘤小鼠注射突变短肽后淋巴细胞的变化情况,验证筛选出的突变短肽的作用。结果:1、通过体外实验筛选出3条短肽制成抗原乳剂。诱导小鼠免疫。2、筛选出的3种短肽均有刺激免疫的效果。16#较其他两种作用效果稍强。