目的:观察氨基甾体H42649对人慢性粒细胞白血病K562细胞系和人慢性粒细胞白血病（CML）原代细胞的抑制增殖和诱导分化作用,并进一步探讨其作用机制。方法:采用液体培养实验,MTT实验,集落培养实验观察H42649对K562细胞和CML原代细胞的增殖能力的影响;采用Wright-Giemsa染色,联苯胺染色,氯化硝基四氮唑蓝（NBT）染色和流式细胞术观察K562细胞和CML原代细胞功能变化,评价H42649对K562细胞和CML原代细胞的诱导分化作用;通过荧光分光光度计检测H42649作用于K562细胞和CML原代细胞30min后细胞内游离钙离子浓度的变化;通过Real-time PCR检测H42649对K562细胞和CML原代细胞钙通道蛋白mRNA的表达的影响;通过Real-time PCR检测H42649对K562细胞和CML原代细胞bcr/abl融合基因mRNA的表达的影响。结果:1.氨基甾体H42649对K562细胞和CML原代细胞增殖的影响。在连续培养的1～5d,不同浓度的H42649(10^-9～10^-5mol/L)可以抑制K562细胞细胞和CML原代细胞增殖。经10^-6mol/L H42649培养5d,MTT实验显示K562细胞生长抑制率为（55.26±2.54）%,CML原代细胞生长抑制率分别为（63.53±2.36）%,且这种抑制作用呈一定的剂量依赖关系。2.氨基甾体H42649对K562细胞和CML原代细胞分化的影响。K562细胞和CML原代细胞培养5d后,Wright-Giemsa染色,光镜下与对照组比较经H42649处理后的细胞均可见体积变大,核浆比例减少,表现一定程度的分化。细胞内血红蛋白联苯胺染色显示,10^-6mol/L H42649作用5d后,K562细胞联苯胺染色A值为（0.2701±0.1960）,较对照组（0.0879±0.0645）显著升高（p＜0.01）。CML原代细胞NBT染色A值为（1.7539±0.0280）,较对照组（1.0397±0.1731）显著升高（p＜0.01）。流式细胞仪分析显示,10^-6mol/L H42649作用于K562细胞4d后,细胞膜上CD71表面标记表达阳性率为84%。作用于CML原代细胞4d后,细胞膜上CD14表面标记表达阳性率为87%。3.氨基甾体H42649抑制K562细胞和CML原代细胞的增殖和诱导其分化作用的机制研究。（1）氨基甾体H42649对K562细胞内和CML原代细胞内游离[Ca²⁺]的影响。用Fura-2/AM负载K562细胞,经10^-6mol/L H42649处理30min后,其A值为（133.0917±2.8980）,与对照组（166.1050±2.3526）比较显著下降（p＜0.01）;用Fura-2/AM负载CML原代细胞,经10-6mol/L H42649处理30min后,其A值为（126.1700±3.1968）,与对照组（178.8533±5.1460）比较显著下降（p＜0.01）。（2）Real-time PCR检测氨基甾体H42649作用后K562细胞和CML原代细胞钙通道蛋白mRNA的表达量变化。分别提取对照组（无水乙醇处理）和试验组(10^-6mol/L H42649处理)细胞的mRNA,反转录成cDNA,使用实时定量PCR法进行相对定量。最终得到K562细胞钙通道蛋白基因在对照组和试验组的相对含量（以内参校正后得值）分别是:2.05×10^-3（对照组）和5.94×10^-3（试验组）,试验组/对照组=2.90;CML原代细胞钙通道蛋白基因在对照组和试验组的相对含量（以内参校正后得值）分别是:3.48×10^-3（对照组）和5.94×10^-3（试验组）,试验组/对照组=1.70。即H42649处理钙通道蛋白mRNA的表达上调。（3）Real-time PCR检测氨基甾体H42649作用后K562细胞和CML原代细胞bcr/abl融合基因mRNA的表达量变化。分别提取对照组（无水乙醇处理）和试验组(10^-6mol/L H42649处理)细胞bcr/abl融合基因的mRNA,反转录成cDNA,使用实时定量PCR法进行相对定量。最终得到K562细胞bcr/abl基因在对照组和试验组的相对含量（以内参校正后得值）分别是:5.30×10^-2（对照组）和2.13×10^-2（试验组）,试验组/对照组=0.40;CML原代细胞bcr/abl基因在对照组和试验组的相对含量（以内参校正后得值）分别是:6.42×10^-2（对照组）和2.37×10^-2（试验组）,试验组/对照组=0.37。即H42649处理bcr/abl mRNA的表达下调。结论:1.氨基甾体H42649能显著抑制K562细胞和CML原代细胞的增殖,并呈一定的剂量依赖关系。2.氨基甾体H42649具有诱导K562细胞向红系分化和诱导CML原代细胞向单核巨噬样细胞分化的作用。3.氨基甾体H42649作用K562细胞和CML原代细胞30min,可导致细胞内游离钙含量下降。4.氨基甾体H42649可以诱导K562细胞和CML原代细胞钙通道蛋白mRNA表达上调。5.氨基甾体H42649可以诱导K562细胞和CML原代细胞bcr/abl融合基因mRNA表达下调。