研究目的研究Elabela对人脐带华通胶间充质干细胞(WJ-MSCs)定向心肌样细胞分化的影响以及对APJ表达量的影响。研究方法复苏冻存的人脐带来源的WJ-MSCs,当细胞汇合度达到90%以上时,对细胞进行传代培养。将传代后的细胞置于细胞标准孔板上培养,待汇合度达到80%以上时,添加特定浓度的5氮孢苷(5-aza)培养基诱导24h,将诱导分化的细胞随机分为实验组与对照组,实验组更换为含Elabela的10%胎牛血清DMEM低糖培养基继续培养,对照组更换为含10%胎牛血清DMEM低糖培养基继续培养。分别于诱导第7,14,21和28d,观察、记录细胞形态变化以及生长情况,并收集两组各阶段细胞总RNA和总蛋白,利用实时荧光定量PCR和Western blot技术检测心肌特异性标记物Connexin 43、c Tn T、Nkx2.5 m RNA及蛋白表达;培养至28d时,利用细胞免疫荧光染色技术检测分化后的心肌细胞特异性转录因子Nkx2.5的表达情况;同时用实时荧光定量PCR技术检测两组细胞目的基因APJ表达量,应用流式细胞检测技术检测第28d两组细胞APJ的表达情况。研究结果在人脐带WJ-MSCs定向心肌样细胞诱导分化过程中,倒置显微镜下实验组和对照组的心肌样细胞在分化过程中数量逐渐增多,实时荧光定量PCR和Western blot技术检测结果显示:实验组心肌特异性标记蛋白c Tn T和Nkx2.5表达量较对照组明显升高,有显著性的差异(P<0.05)。在第21d,28d,实验组c Tn T m RNA表达量分别提高到对照的124%和113%,Nkx2.5 m RNA表达量分别提高到对照的224%和250%;Nkx2.5和c Tn T在第14d表达量达到最高,在第21d之后都出现不同程度的下降,实验组和对照组各阶段Connexin43 m RNA和蛋白表达量变化无显著性差异(P>0.05)。实验组和对照组的细胞免疫荧光技术检测到心肌特异性转录因子Nkx2.5表达均为阳性;两组细胞分化各时间节点均有目的基因APJ m RNA表达,第7d两组APJ表达量无明显差异(P>0.05),第14d、21d和28d,实验组APJ表达量较对照组明显升高(P<0.05),尤其第14d差异最显著,升高达647%。流式细胞技术结果表明:实验组和对照组诱导分化第28d的APJ表达,与未分化人脐带WJ-MSCs比较,APJ表达量分别升高33.03%、61.65%,实验组较对照组APJ表达量增加186.7%,具有显著统计学差异(P<0.05)。研究结论人脐带WJ-MSCs在5-aza诱导下成功分化为心肌样细胞,Elabela在人脐带WJ-MSCs向心肌样细胞分化过程中起促进作用。Elabela在人脐带WJ-MSCs向心肌样细胞分化过程对APJ表达有一定促进作用。