脂肪源性干细胞诱导分化软骨细胞的初步研究

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目的:研究脂肪源性干细胞(adipose derived stern cells ADSCs)的分离培养的方法,探索SD大鼠ADSCs在体外向软骨方向定向诱导分化的方法和能力。 方法:无菌条件下从月龄SD大鼠腹股沟区皮下获取脂肪组织,0.1%I-型胶原酶消化分离、培养ADSCs,流式细胞仪测定CD<,44>、CD<,45>和CD<,49d>抗原的表达,MTT比色法测定细胞生长活力。ADSCs在基础培养基中传至第二代时改换培养基,诱导向软骨细胞分化,培养2周,阿新兰染色、Ⅱ型胶原免疫组化鉴定向软骨细胞分化能力。 结果:SD大鼠脂肪组织能够分离培养出生长旺盛的.ADSCs。经流式细胞仪检测CD<,44>表达阳性,CD<,49d>表达阳性和CD<,45>表达阴性:经过形态学动态变化的观察,生长曲线测定,证明为功能活跃的干细胞。将ADSCs向软骨细胞诱导培养2周后,阿新兰染色阳性,免疫组化鉴定有Ⅱ型胶原的表达。 结论:SD大鼠脂肪组织能够分离培养出ADSCs,生物学特性与骨髓间充质干细胞(bone malTOW mesenchymal stromal cells MSCs)相似,能向软骨细胞分化,有希望成为软骨组织工程理想的种子细胞来源。
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