高山离子芥铁转运蛋白基因编码序列的克隆及其抗氧化作用的分析

来源 :兰州大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:wangxiaoyuzhang
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高山离子芥(Chorispora bungeana Fish & C.A.Mey)是一种稀有的高山冰缘植物,具有很强的抗寒能力,是研究植物适应冷冻环境机制的理想材料。本文以高山离子芥为实验材料,克隆了一个铁转运蛋白基因(CbIRT),并且在不同温度(4℃、0℃和-4℃)和不同铁浓度(0uM、200 uM和500 uM)对其处理下,系统的检测了抗氧化系统和CbIRT基因的表达响应。 铁转运蛋白(iron transport protein,IRT)是具有跨膜运输离子功能的特殊蛋白质,属于金属离子转运家族的成员.本研究运用RACE方法从高山离子芥中克隆得到完整的铁转运蛋白的cDNA,命名为CbIRT(基因登录号为EU330924).该基因全长1 290 bp,包含一个1 035 bp的开放阅读框(ORF),编码344个氨基酸的蛋白.系统进化树分析显示该基因与拟南芥AtIRT1和遏蓝菜TcIRT-G的亲缘关系最近,同源性分别达到了87.4%和86.5%,而在氨基酸序列水平与拟南芥AtIRT1的同源性达到了89%,表明克隆得到的CbIRT属于金属离子转运体家族成员.实时荧光定量方法对高山离子芥CbIRT基因在不同温度和铁营养水平条件下的表达情况进行分析表明,CbIRT对零下低温和零上低温的表达水平呈截然不同的反应;正常铁营养状态下CbIRT是微量表达的,而缺铁及低温处理都可以大幅度地促进该基因的表达,富铁可以抑制该基因的表达.显示了该蛋白在转运Fe离子方面的重要作用。 在低温处理过程中我们还发现高山离子芥抗寒性体现在抗氧化的几种酶活性上,在铁胁迫和低温处理过程中,几种抗氧化酶都会随着处理时间有规律的变化。我们认为高山离子芥能够适应低温环境,和CbIRT基因的表达有着密切的关系,同时也是通过各种抗氧化酶之间相互协同作用来实现的。
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