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背景与目的:心血管疾病(cardiovascular disease,CVD)系由一系列危险因素诱发或引起的心脏及血管疾病。目前,心血管疾病已经成为全球范围内最具危害性的疾病之一。血管内皮细胞(vascular endothelial cells,VECs)覆盖于血管腔表面,能够合成、释放多种血管活性物质和细胞因子,是血管内环境稳态与血管功能的重要组成部分,在多种CVD的发生与进展中起着重要作用。黄芪皂苷Ⅲ(AstragalosideⅢ,AS-Ⅲ)系黄芪根部所含的一种三萜皂苷,是黄芪皂苷类的主要活性成分之一。前期研究发现AS-Ⅲ对血管内皮细胞具有一定的抗炎作用,但其作用机制尚未完全阐明。本项研究旨在探讨AS-Ⅲ对VECs中肿瘤坏死因子-α转化酶(tumor necrosis factor-αconverting enzyme,TACE)的活化作用,以及基于TACE调控表皮生长因子受体(epithelial growth factor receptor,EGFR)信号通路的作用,并进一步阐明TACE激活的分子机制,为中药黄芪发挥心血管保护作用提供新的实验室依据。方法:选取bEnd.3血管内皮细胞作为研究对象。(1)将体外培养的bEnd.3细胞接种于96孔细胞培养板上,以不同浓度AS-Ⅲ预处理细胞,采用WST-1实验检测细胞活力变化;(2)将体外培养b End.3细胞接种于6孔细胞培养板上,以AS-Ⅲ及TACE抑制剂(TAPI-0)处理细胞,采用TACE酶活性试剂盒检测其酶活性水平;(3)将体外培养b End.3细胞接种于6孔细胞培养板上,以AS-Ⅲ与不同信号通路抑制剂处理细胞,采用免疫蛋白印迹(Western Blot)检测TACE、ERK1/2、AKT、EGFR及p38的磷酸化程度。结果:(1)细胞活力:同对照组相比,AS-Ⅲ浓度在10~1000 n M范围内并不抑制细胞活力(P>0.05);当AS-Ⅲ浓度达到10μM时,细胞活力明显降低(P<0.01);(2)TACE酶活性:AS-Ⅲ可诱导TACE Thr735位点磷酸化,进而增强TACE酶活性,而这些效应均可被TAPI-0预处理后显著抑制(P<0.01);(3)Western Blot:同对照组比较,AS-Ⅲ可诱导依赖于TACE的EGFR反式激活以及ERK1/2和AKT信号通路的激活(P<0.01)。AS-Ⅲ能够诱导p38活化,p38抑制剂(SB203580)对AS-Ⅲ诱导的TACE的激活与EGFR的激活均具有显著的抑制作用(P<0.01)。结论:AS-Ⅲ通过p38依赖方式激活VECs中基于TACE的EGFR信号,这对于黄芪的心血管系统作用有重要意义,同时也为黄芪皂苷其他单体功能拓展的研究提供了参考。