美洲一枝黄花和烟草中咖啡酰奎尼酸的分离与鉴定

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美洲一枝黄花中含有多炔、二萜、三萜、三萜皂苷、酚类、植物精油等多种生物活性成分。烟草中含有绿原酸、芸香苷、烟碱和茄尼醇等多种生物活性成分,这些成分可用于医药、食品、环保、农业等诸多行业。美洲一枝黄花和烟草中均含有咖啡酰奎尼酸类物质,具有抗菌、抗病毒、抗癌等多种药理作用。从美洲一枝黄花和烟草废料中提取这类物质,可以实现废弃植物材料的高效资源化利用。本工作以美洲一枝黄花和烟草材料为研究对象,对其中的咖啡酰奎尼酸类物质一绿原酸和二咖啡酰奎尼酸的提取、分离、纯化进行了研究。(1)烟草中绿原酸的分离纯化:通过对超声波提取、大孔树脂吸附、聚酰胺柱层析和乙酸乙酯萃取,确定了适宜的分离纯化条件。在40%乙醇,50℃,超声提取1h,用大孔树脂CN-3可以对烟草提取液起到吸附和脱色的作用,经聚酰胺吸附后,洗脱剂为30%的乙醇,洗脱剂用量为4BV。乙酸乙酯与浓缩液按体积比为1:1进行萃取,萃取四次。经进一步分离纯化可以得到纯度为85%的绿原酸。(2)美洲一枝黄花中二咖啡酰奎尼酸的分离纯化:通过不同浓度乙醇提取实验,确定了二咖啡酰奎尼酸的乙醇提取浓度为60%乙醇。检测了美洲一枝黄花不同部位中绿原酸和二咖啡酰奎尼酸的含量,结果花蕾中二种物质的含量最高。通过对溶剂萃取、大孔树脂吸附、聚酰胺柱层析和乙酸乙酯萃取的研究,确定了最佳的分离纯化条件。石油醚脱色后,用乙酸乙酯萃取,二咖啡酰奎尼酸主要集中于乙酸乙酯层。用大孔树脂进一步分离纯化,经分别用体积浓度27%乙醇和55%乙醇的动态洗脱和洗杂,最终得到纯度为60%的二咖啡酰奎尼酸。(3)用高效液相色谱-质谱(HPLC-MS)联用的方法对烟草及五种菊科植物中的咖啡酰奎尼酸类物质进行结构鉴定。对负离子模式下的总离子流图以及一级、二级质谱图分析,共鉴定出了七种咖啡酰奎尼酸类物质,包括四种单咖啡酰奎尼酸,三种二咖啡酰奎尼酸,一种咖啡酸衍生物菊苣酸。
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