采用原位无搅动模式制备了具有双峰特征孔结构的聚甲基丙烯酸缩水甘油酯(GMA-EDMA)整体固定相和灌注色谱固定相基质材料，考察温度、致孔剂的组成和交联剂的含量对整体材料孔径分布的影响，选定具有适合分离蛋白质孔径分布的整体材料的聚合条件，并对其表面形态，渗透性能进行表征；分别在GMA-EDMA基质上键合二乙胺和亚氨基二乙酸，制得GMA-EDMA-DEAE弱阴离子交换整体柱、弱阴离子交换灌注色谱柱和IDA弱阳离子交换灌注色谱柱，考察色谱条件对分离的影响；同时考察温度、缓冲液浓度及pH值等因素对动态吸附量、突破曲线形态等色谱性能的影响；试验结果表明所制备的整体固定相和灌注色谱固定相都具有优异的传质性能和较大的吸附容量，成功用于蛋白质和低聚核苷酸等生物大分子的快速分离分析。