本试验对空白纳米乳进行了研究,在此基础上制备出水包油型原花青素纳米乳,并对其质量稳定性、安全性、药效学和释药性能进行了研究。第一部分:空白纳米乳的研制。以脂肪醇聚氧乙烯醚(AEO-7)、聚乙二醇400单硬脂酸酯(PEG400MS)、聚氧乙烯脂肪酸酯(LAE-9)、蓖麻油聚氧乙烯醚-40(EL-40)、蓖麻油聚氧乙烯醚-35(EL-35)和烷基糖苷(APG)等为表面活性剂,以甘油、丙二醇和1,3-丁二醇为助表面活性剂制备纳米乳。通过绘制伪三元相图研究不同的表面活性剂、助表面活性剂和油相等因素对纳米乳区形成及其稳定性的影响。结果表明,表面活性剂、助表面活性剂、表面活性剂和助表面活性剂的质量比值(Km)、油等对纳米乳的形成均有影响。共制备出AEO-7/IPM/水、EL-40/IPM/水、EL-35/span80/IPM/水以及EL-40/span80/IPM/液体石蜡/水4种纳米乳,其外观澄明,性质稳定,经透射电子显微镜检测,其粒径均在1～100nm之间,符合纳米乳的要求。第二部分:原花青素纳米乳的研制。采用伪三元相图法进行处方筛选,将原花青素溶入EL-35/span80/IPM/甘油/水纳米乳中制备出原花青素纳米,并考察其理化性质和稳定性,建立紫外可见分光光度计测定原花青素纳米乳含量的方法。结果表明,原花青素纳米乳外观暗红色、澄清透明、性质稳定;在透射电子显微镜下观察,其为球状液滴,粒径在1～100nm之间,符合纳米乳的要求;确定原花青素检测波长为550nm,标准曲线方程为:A = 0.0028 C + 0.0117 (A为吸光度,C为浓度,μg/mL),相关系数r = 0. 9996。线性浓度范围30～350μg/ml。平均回收率99.32%,RSD为2.31%。第三部分:利用TT-6(B)型透皮吸收仪研究原花青素纳米乳的透皮率。结果表明,以单位面积累积透过量(Q)对时间(t)进行线性回归,原花青素纳米乳溶液Q=207.59t-80.587,r=0.9691,滲透率常数207.59 (μg﹒cm-2﹒h-1),原花青素水溶液:Q=174.6t-26.318,r=0.9894,滲透率常数174.6 (μg﹒cm-2﹒h-1)。所以,原花青素具有很强的透皮能力,有望成为原花青素的透皮给药制剂。第四部分:原花青素纳米乳的安全性评价。通过细胞毒性试验、皮肤刺激试验、眼部刺激试验和皮肤致敏试验对原花青素纳米乳进行安全性评价。结果表明,原花青素纳米乳对小鼠的皮肤和家兔的眼部均无刺激,也无皮肤致敏现象,原花青素纳米乳对小鼠成纤维细胞的细胞毒性为<2级,无明显毒性。因此,原花青素纳米乳无明显毒性,符合纳米乳给药系统要求。第五部分:原花青素纳米乳对小鼠皮肤紫外氧化损伤的保护作用。将24只小鼠随机分为空白对照组、紫外线模型组、原花青素紫纳米乳组和VC溶液组。除空白对照组外,其余各组都接受紫外线照射,并测定各组皮肤的SOD活性和MDA含量。结果表明,与正常组相比,模型组SOD的活性降低,MDA的含量增加(p<0.05);与模型组相比,原花青素纳米乳组和VC溶液组SOD活性显著提高,MDA含量减少(p<0.05);原花青素纳米乳组和VC溶液组之间各指标无统计学意义。因此,原花青素纳米乳能够有效提高紫外氧化损伤皮肤组织中的SOD活性,降低MDA的含量,具有皮肤紫外氧化损伤的保护作用。