卵巢癌是一种严重威胁着女性身体健康的恶性肿瘤，其死亡率居高不下。到目前为止，认为，影响化疗失败的主要原因仍然是肿瘤耐药。寻找更有利，更安全的能够攻克肿瘤耐药的方法一直都是一个难题。本文，寻找卵巢癌高表达基因，同时也是学者们定义为肿瘤治疗新靶点的EGFR基因，通过基因干扰技术，来探讨干扰质粒对其表达的影响，和对肿瘤细胞周期与凋亡的影响。为逆转肿瘤耐药提供可靠的临床依据。有文献报道，超声微泡辅助的RNAi技术可能成为攻克卵巢癌的的重要手段超声微泡主要作用是提高基因的转染率[4]，所以提示我们对于体外培养的肿瘤细胞，转染率需达到一定值，这样才能更好的达到基因干扰作用。siRNA技术是基因沉默的一种手段，它与基因敲除不同，它是在不损伤DNA的基础上，对该基因进行干扰，使该基因表达降低或者消失，并且能在细胞内稳定表达的一种技术。沉默与肿瘤发生和多药耐药有关系的基因，成为了癌症治疗的新方向。据报道：基因沉默与乙酰化有关[5]。组蛋白乙酰转移酶和组蛋白去乙酰化酶的动态平衡作用在生物体内制约着染色体各个区的核心组蛋白的乙酰化程度，当组蛋白乙酰转移酶发挥作用占主导的时候，转录活动就会被激活，反之，转录活性就会受到抑制。一旦这种平衡被打破，细胞就会恶化，引发癌症。有文献报道：对于EGFR的抑制剂，针对于临床上皮性肿瘤治疗中产生的耐药问题，许多临床研究均证明EGFR高表达与肿瘤耐药有关；HDACs在EGFR转录表达中至关重要，在结肠癌中HDACIs不能降低EGFR mRNA的表达[6]，但是在雌激素受体阴性的乳腺癌细胞中HDACIs能够降低EGFR mRNA的稳定性，进而阻断EGF通路[7]，所以推测HDACIs不能在所有的癌症中都能发挥作用。我们针对这一事实，来检测一下HDAC1和EGFR在卵巢癌耐药细胞中的关系。EGFR配体与EGFR受体家族的不同组合，形成的均质和异质二聚体构成了复杂多样的生物代谢过程，EGFR主要路线有Ras/Raf/MEK/ERK和PI3K/PDK1/Akt，在EGFR发挥作用时，Sp1起到非常重要的作用，HDACIs能够使Sp1和EGFR分开，从而降低EGFR的表达。顺铂、紫杉醇是目前公认的最有效治疗卵巢癌的化疗药物。本实验以顺铂敏感株SKOV3及其耐药株SKOV3/DDP为研究对象，靶向导入siRNA-HDAC1重组质粒，研究siRNA-HDAC1对SKOV3/DDP耐药细胞EGFR基因表达的调控。本文研究表明：siRNA-HDAC1可提高卵巢癌细胞的化疗敏感性，进而起到逆转卵巢癌耐药作用。本实验有两部分内容：第一部分主要阐述HDAC1在卵巢癌细胞中表达的差异性研究：MTT法测定卵巢癌细胞生存率及其IC50；用免疫细胞化学染色法检测在两种卵巢癌细胞中HDAC1基因表达水平。结果：MTT测定SKOV3/DDP细胞耐药指数为3.2；SKOV3/DDP细胞中HDAC1蛋白表达水平要显著高于SKOV3。第二部分主要阐述干扰质粒对卵巢癌细胞生长影响：提取质粒送公司测序验证；control质粒，siRNA-HDAC1分别转染SKOV3/DDP细胞；MTT检测转染后的细胞生存状况，采用Real-time PCR分析siRNA-HDAC1对EGFRmRNA表达的影响；流式细胞术测定siRNA-HDAC1对细胞周期和凋亡的影响。从而研究在卵巢癌耐药细胞中EGFR表达情况。本文研究结果表明：我们提取的siRNA-HDAC1质粒经鉴定可用于细胞转染实验；经siRNA-HDAC1转染的SKOV3/DDP细胞，其HDAC1mRNA和EGFR mRNA表达水平均下调；MTT测定结果显示，SKOV3/DDP细胞对顺铂敏感性增加，细胞增殖率下降；流式细胞术结果指示，siRNA-HDAC1质粒使细胞周期被阻滞于G0/G1期。凋亡实验指示，转染siRNA-HDAC1质粒后能够促进细胞凋亡。结论：1、在卵巢癌耐药细胞中，HDAC1与EGFR均过表达，其过表达与肿瘤多药耐药（MDR）有关。2、siRNA-HDAC1转染卵巢癌细胞后可降低EGFR mRNA表达水平。推测EGFR参与细胞周期和凋亡的调节过程。同时siRNA-HDAC1干扰促进癌症细胞凋亡。3、siRNA-HDAC1能够增加卵巢癌细胞对药物的敏感作用，说明对耐药卵巢癌的治疗过程中，可以针对HDAC1靶向治疗，逆转耐药。