维药芹菜根降脂活性成分研究及总黄酮提取工艺研究

来源 :广西中医学院 广西中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:whitejet
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目的:本论文主要以新疆地产芹菜ApiumgraveolensL.为研究对象,首先对芹菜根总黄酮提取工艺进行研究,筛选出最佳提取条件以及适合富集芹菜根总黄酮的大孔树脂。其次对其根部进行了化学成分研究,并对乙酸乙酯部位、正丁醇部位以及部分单体化合物进行药理学研究,从中筛选出活性成分,为开发新药提供科学的实验依据。   方法:采用正交实验法,以提取时间、提取次数、乙醇浓度以及料液比为因素,以总黄酮显色液的吸光度为指标进行实验,筛选出最佳提取条件;采用静态吸附-解吸附的方法,以大孔树脂富集总黄酮的量为考察参数,对芹菜根总黄酮进行工艺研究,从中筛选出富集芹菜根总黄酮最佳的大孔树脂。将70%乙醇渗漉提取,减压回收溶剂,所得的浸膏用水溶解,依次用石油醚、氯仿、醋酸乙酯、正丁醇萃取,得到四个部位,再利用各种色谱方法分别对其四个部位进行分离纯化,得单体化合物。根据理化常数测定和光谱数据(EI-MS、1H-NMR、13C-NMR)测定确定单体化合物的结构。药理方面采用本实验室自己构建的含大鼠apo-AⅠ及其受体SR-BⅠ基因的酵母双杂交系统,对该样品进行降脂活性的初筛。   结果:维药芹菜根总黄酮最佳提取工艺条件为:五倍量70%乙醇,提取三次,每次1小时;富集芹菜根总黄酮的最佳大孔吸附树脂为D101。从其根部共分离出10个单体化合物,经化学性质和光谱数据确定了其中8个的结构,它们依次为:佛手苷内酯(bergapten)、豆甾醇(stigmasterol)、棕榈酸豆甾醇酯(stigmasterolpalmitate)、芹菜素(Apigenin)、木犀草素-7-O-β-D葡萄糖芹菜苷(Luteolin-7-O-β-D-apiofuranosyl-(1-2)-β-D-glucopyranoside)、香叶木素-7-O-β-D葡萄糖苷(diosmetin-7-O-β-D-glucopyranoside)、洋芹素-7-O-β-D葡萄糖苷(Apigenin-7-O-β-D-glucopyranoside)、柯伊利素-7-O-β-D葡萄糖苷(chrysoeriol-7-O-β-D-glucopyranoside)。含大鼠apo-AⅠ及其受体SR-BⅠ基因的酵母双杂交系统在筛选的跟踪下进行组分或单体的优选,从而找到降脂配方中的真正有效的成份。   结论:筛选出维药芹菜根总黄酮最佳提取工艺以及最佳吸附树脂D-101。从其根部共分离并鉴定出了八个单体化合物的结构。采用本实验室自己构建的含大鼠apo-AⅠ及其受体SR-BⅠ基因的酵母双杂交系统,对样品进行降脂活性的初筛,乙酸乙酯组分及正丁醇组分浸膏明显促进这两种蛋白的相互作用,初步确定为活性组分。
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