赤水栽培金钗石斛质量控制的初步研究

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石斛(Dendrobine)是我国常用名贵中药材,为兰科石斛属多种植物的新鲜或干燥茎的统称。在《神农本草经》与《本草纲目》中,石斛被列为上品,具有滋阴清热、生津益胃、润肺止咳、明目强身等功效。现代药理研究表明,石斛还具有抗肿瘤、抗衰老、增强机体免疫力、扩张血管及抗血小板凝集等作用,因此石斛在临床上及中药复方中被广泛应用。我国有76种石斛属植物,其中有30多种作为药用,金钗石斛(Dendrobium nobile)为《中国药典》收载的石斛品种,也是研究最多的品种之一。本文以贵州省赤水市不同地域产的12批次金钗石斛为研究材料,首先比较了不同提取方法对金钗石斛植物中的总生物碱提取效率的差异,以选取提取最佳的提取方法。之后建立紫外可见分光光度法(UV-Vis)和高效液相色谱法(HPLC)对金钗石斛植物中总生物碱含量以及主要成分-石斛碱含量检测的方法。这两种方法均可作为评判药材质量的标准之一。根据总生物碱与石斛碱含量测定的结果,结合金钗石斛生长环境中重金属含量数据,初步分析重金属含量对金钗石斛质量的影响。结果表明:1、比较了三种不同的提取方法,确定超声提取法提取效率高且操作简便、省时,之后对该提取方法中的条件进行了优化,最后确定生物碱类物质的提取条件为以氯仿为溶剂,在频率50 Hz、温度70℃条件下,于超声振荡器中振荡提取30 min×3次。2、运用酸性染料比色法,在620nm处,利用UV-Vis测定了贵州境内金钗石斛植物总生物碱的含量。石斛碱的标准曲线范围是2-20μg/ml,回归方程为:A=-0.0016+0.0327C(r=0.99984,n=5),并且稳定性、加样回收率等指标均表明以该方法测定总生物碱含量是可靠的。测定结果范围在0.237%-0.480%之间。3、选取石斛碱含量作为质量控制指标,运用高效液相色谱法,直接测定了金钗石斛中石斛碱的含量。石斛碱标准曲线范围是20-200ng/μl,回归方程为A=115936+6387.6C (ng/μl),相关系数R=0.9993,精密度、稳定性、加样回收率等指标表明该法测定石斛碱含量是可靠的。测定结果范围在0.073-0.143%之间。4、土壤中重金属含量对总生物碱以及石斛碱的含量有较明显的影响。
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